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目的:本研究旨在探讨西洋参茎叶皂苷(PQS)对PC12细胞脑缺血损伤的保护作用及机制。
方法:大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞((pheochromocytomacellline,PC12)是常用的神经生物和神经化学研究的细胞模型。本文以PC12细胞建立脑缺血五种损伤模型,利用MTT法检测了PQS对缺血损伤的PC12细胞的保护效应;采用LDH法,检测了PQS对细胞膜的影响。应用生物化学方法,借助于紫外分光光度仪,观察PQS对PC12细胞拟缺糖缺氧损伤中抗氧化酶SOD(superoxidedismutase)、脂质过氧化物MDA(malondialdehyde)和NO含量,GLU神经毒损伤中NOS活性和NO含量的影响。应用RT-PCR法和琼脂糖凝胶电泳方法检测PQS对PC12细胞拟缺糖缺氧损伤凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。
结果:1.西洋参茎叶皂苷(PQS)对PC12细胞拟缺糖缺氧损伤具有明显保护作用。表现为PQS可显著提高细胞存活力和降低LDH活性(p<0.01),以PQS100ug/mL保护最优。显著提高SOD活性和降低上清液中NO含量(p<0.01);PQS250ug/mL、PQS100ug/mL组能显著降低MDA含量(p<0.01)。2.西洋参茎叶皂苷(PQS)对PC12细胞自由基、咖啡因、NO损伤模型均具有明显保护作用。表现为PQS可显著提高细胞存活力和降低LDH活性(p<0.01)。3.西洋参茎叶皂苷(PQS)对PC12细胞GLU神经毒性损伤具有明显保护作用。表现为PQS可显著提高细胞存活力和降低LDH活性(p<0.01),显著降低NOS活性和NO含量(p<0.01)。4.拟缺糖缺氧损伤后,PQS可上调bcl-2基因的表达,下调bax基因的表达。
结论:(1)PQS对脑缺血损伤细胞具有明显的保护活性,稳定了膜结构,保护细胞免受损伤。(2)PQS可明显提高SOD酶活性,降低MDA含量以及NOS酶活性和NO含量,表明PQS抗缺血保护机制是提高内源性抗氧化酶活力,增加自由基清除,降低NOS活性而减少NO的生成,减轻NO神经毒性损伤。(3)RT-PCR结果表明:PQs能够上调bcl-2基因和下调bax基因的表达,上调bcl-2与bax的比值,可能是通过调控凋亡基因的表达起到抗损伤保护作用。