柯萨奇B3病毒对心肌微血管内皮细胞骨架、紧密连接和通透性的影响及p38MAPK的调控作用

• 作 者: 邵东风
• 发表日期: 2006年期
• 关键词: 柯萨奇病毒 心肌微血管内皮细胞 细胞骨架 紧密连接 F-actin ZO-1 通透性 p38 MAPK

目的： 病毒性心肌炎是严重危害人类健康的心脏疾患，可引起心律失常、心力衰竭、扩张性心肌病和心脏猝死等；而柯萨奇B₃（CVB₃）病毒是导致人类心肌炎的最常见致病原，其感染途径具有特殊性，需要两次穿越血管内皮细胞最终到达靶器官，因而血管内皮细胞在病毒的组织嗜性和心肌炎的发病过程中起着重要的作用。然而心肌微血管内皮细胞（CMEC）在这一过程中是如何发挥作用的?内皮细胞骨架蛋白和紧密连接蛋白发生何种改变?p38 MAPK对此过程是否参与?又是如何进行调控的?目前尚未见研究报道。因此，本研究主要目的： （1） 观察CVB₃对心肌微血管内皮细胞F-actin和ZO-1形态及含量的影响； （2） 检测CVB₃对心肌微血管内皮细胞活性和通透性的影响； （3） 探讨p38 MAPK通路在这一过程中的作用； 通过研究，可进一步阐明CVB₃感染心脏靶器官的分子机制，并为临床工作中CVB₃感染尤其是病毒性心肌炎的防治提供新靶点。 方法： （1） 激光扫描共聚焦显微镜观测F-actin和ZO-1的双重免疫荧光染色； （2） 流式细胞仪定量测定F-actin和ZO-1蛋白含量； （3） MTT比色法检测心肌微血管内皮细胞活力； （4） Transwell测量心肌微血管内皮细胞单层通透性。