紫细菌光合色素的环境适应性调控及含奥氏酮菌株色素蛋白复合体分离条件初探

来源 :华侨大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jbwjbw
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
不产氧光合细菌(APB)光合色素及色素蛋白复合体(PPC)的环境适应性调控研究,是国际上关注的热点之一,本文针对该研究的进展及存在的问题进行了系统综述。活细胞吸收光谱是APB鉴定的一项重要指标,目前将活细胞呈现的~421nm特征光谱归为类胡萝卜素(Car)特征峰,但本课题组前期工作并没有检测到相关Car积累,围绕探索该特征光谱形成的原因,本文以Rhodobacterazotoformans R7为材料,考察了呈现该特征光谱的影响因素,通过光合色素组成的分析,提出了菌体积累镁原卟啉IX单甲基酯(MPE)也能形成该特征光谱的观点。针对产奥氏酮系Car的紫色硫细菌光合色素环境适应性调控研究相对薄弱这一问题,在菌株的分离、纯化和鉴定的基础上,本文以一株产奥氏酮的嗜盐海洋着色菌283-1为材料,采用吸收光谱、TLC和LC-MS法,对该菌株积累的光合色素组分进行了分析鉴定,进一步考察了6种理化因子对菌体内积累光合色素组成的影响。比较了现有APB Car提取方法,建立了适合Okenone系Car大量制备的方法。现有文献报道,在分离纯化过程中含Okenone系Car的PPC很不稳定,难以分离。鉴于此,本文初步探索了283-1菌株PPC分离的方法,以寻找稳定的PPC的分离条件,为在蛋白质水平上进行PPC的调控研究奠定基础。主要研究结果如下:R7菌株在以谷氨酸盐为氮源生长时,其活细胞吸收光谱上呈现421nm特征峰,该特征峰强度受甘氨酸调控,甘氨酸浓度较低(<7mmol/L)时有助于该特征峰的形成,高浓度则产生抑制作用,15mmol/L时该特征峰基本消失。依据有无421nm特征光谱菌体积累光合色素组分分析,发现大量BChl合成中间产物—MPE的积累,是形成活细胞421nm特征光谱的原因,而非Car的积累。甘氨酸不但对菌体积累MPE具有调控作用,而且对BChl和Car组成也具有明显的调控作用。色素组分分析表明:283-1菌株主要积累BChl aTHGG、BChl aP、OH-R.g-ketoI、BPhe、R.g-ketoIII以及Okenone6种光合色素,其中BChl aP和Okenone积累量最大,高浓度DPA和NaNO2对菌体生长具有明显的抑制作用,在选择的剂量范围内,光强、氧、盐度和甘氨酸则仅影响菌体生长的延滞期,最终生物量比较接近。这6种理化因素对菌体光合色素合成量均有明显影响,对BPhe积累的影响最大,Okenone和BChl aP的相对含量虽有变化,但仍为主要积累的色素组分,其他组分的相对含量有轻微变化。菌体中OH-R.g-ketoI、R.g-ketoIII和Okenone的积累,表明该菌株中至少含有Okenone和R.g-ketoIII2条Car合成途径。对现有Car提取剂和提取方式筛选,以丙酮甲醇(7:2,v/v)为提取剂,2mol/L HCl预处理再浸提,提取液中Car含量最高,进一步采用硅胶柱层析分离,Okenone系Car组分中常残留BPhe或BChl,色素提取液经皂化处理再进行硅胶柱层析,则可有效排除BChl和BPhe的干扰,大量制备Okenone和OH-R.g-ketoI。PPC分离纯化表明:Tween-80作为增溶剂,从283-1菌株中可分离得到结构完整且具有能量传递功能的LH2,分离的LH2在低温黑暗条件下很稳定。LDAO、Tween-80、Triton X-100和SDS均未分离得到LH1-RC,仍需要进一步研究。综上所述,本文提出了MPE积累能使菌体呈现421nm特征光谱的观点,为分析活细胞吸收光谱提供了可靠依据和新的思路。以Marichromatium sp.283-1为材料系统分析了该菌株积累的主要光合色素,并探讨了不同理化因子对其生长和光合色素合成的影响,弥补了产奥氏酮紫色硫细菌光合色素组分研究的不足,为其调控研究提供了材料。建立了一种绿色的Okenone系Car乙醇水提取工艺,为Car大量制备奠定了基础。初步探索了283-1菌株PPC的分离纯化条件,为开展含Okenone菌株PPC的相关研究奠定基础。
其他文献
当今,建筑工程行业在我国飞速发展,对于建筑工程站投标代理是必备产物,建筑工程施工之前的必备环节,既满足了投标单位又满足了招标单位,但目前对于招投标代理工作还有没有进
目的研究妊娠中期高脂血症(HL)的不同诊断标准与妊娠结局的关系。方法选取进行产前检查并分娩的孕妇615例和未孕健康育龄妇女263例,收集全部研究对象的一般资料、妊娠并发症
目的探讨CD200在骨髓增生异常综合征中的表达及临床意义。方法应用流式细胞仪检测46例对照者及150例MDS患者骨髓原始细胞上CD200的表达。对101例MDS患者骨髓细胞进行了染色体
<正> 前言本文总结了当前粗苯回收工艺、设备和生产操作的经验,目的有效地提高祖苯产率、减少洗油损失、防止加热设备的腐蚀。一、粗苯回收工艺及设备1、回收工艺目前粗苯回
通过批量吸附实验研究了水葫芦根粉作为水环境中钒吸附材料的可行性。分别探索了初始V 5+浓度、pH、水葫芦根粉用量和吸附时间对水葫芦根粉吸附钒的影响。结果表明,随着初始V
后金融危机时代,中国宏观经济增速持续下滑,诸多行业出现产能过剩、大幅亏损。在以银行贷款为主要方式的社会融资体系下,商业银行出于风险防控等谨慎性需求纷纷惜贷,企业资产
明清之时,中国社会上先后出现了十大商邦,计有徽商、晋商、山东商、陕西商、江右商、广东商、福建商、宁波商、洞庭商、龙游商。晋商之所以居十大商邦之首,是与其所具有的以
ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技