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不产氧光合细菌(APB)光合色素及色素蛋白复合体(PPC)的环境适应性调控研究,是国际上关注的热点之一,本文针对该研究的进展及存在的问题进行了系统综述。活细胞吸收光谱是APB鉴定的一项重要指标,目前将活细胞呈现的~421nm特征光谱归为类胡萝卜素(Car)特征峰,但本课题组前期工作并没有检测到相关Car积累,围绕探索该特征光谱形成的原因,本文以Rhodobacterazotoformans R7为材料,考察了呈现该特征光谱的影响因素,通过光合色素组成的分析,提出了菌体积累镁原卟啉IX单甲基酯(MPE)也能形成该特征光谱的观点。针对产奥氏酮系Car的紫色硫细菌光合色素环境适应性调控研究相对薄弱这一问题,在菌株的分离、纯化和鉴定的基础上,本文以一株产奥氏酮的嗜盐海洋着色菌283-1为材料,采用吸收光谱、TLC和LC-MS法,对该菌株积累的光合色素组分进行了分析鉴定,进一步考察了6种理化因子对菌体内积累光合色素组成的影响。比较了现有APB Car提取方法,建立了适合Okenone系Car大量制备的方法。现有文献报道,在分离纯化过程中含Okenone系Car的PPC很不稳定,难以分离。鉴于此,本文初步探索了283-1菌株PPC分离的方法,以寻找稳定的PPC的分离条件,为在蛋白质水平上进行PPC的调控研究奠定基础。主要研究结果如下:R7菌株在以谷氨酸盐为氮源生长时,其活细胞吸收光谱上呈现421nm特征峰,该特征峰强度受甘氨酸调控,甘氨酸浓度较低(<7mmol/L)时有助于该特征峰的形成,高浓度则产生抑制作用,15mmol/L时该特征峰基本消失。依据有无421nm特征光谱菌体积累光合色素组分分析,发现大量BChl合成中间产物—MPE的积累,是形成活细胞421nm特征光谱的原因,而非Car的积累。甘氨酸不但对菌体积累MPE具有调控作用,而且对BChl和Car组成也具有明显的调控作用。色素组分分析表明:283-1菌株主要积累BChl aTHGG、BChl aP、OH-R.g-ketoI、BPhe、R.g-ketoIII以及Okenone6种光合色素,其中BChl aP和Okenone积累量最大,高浓度DPA和NaNO2对菌体生长具有明显的抑制作用,在选择的剂量范围内,光强、氧、盐度和甘氨酸则仅影响菌体生长的延滞期,最终生物量比较接近。这6种理化因素对菌体光合色素合成量均有明显影响,对BPhe积累的影响最大,Okenone和BChl aP的相对含量虽有变化,但仍为主要积累的色素组分,其他组分的相对含量有轻微变化。菌体中OH-R.g-ketoI、R.g-ketoIII和Okenone的积累,表明该菌株中至少含有Okenone和R.g-ketoIII2条Car合成途径。对现有Car提取剂和提取方式筛选,以丙酮甲醇(7:2,v/v)为提取剂,2mol/L HCl预处理再浸提,提取液中Car含量最高,进一步采用硅胶柱层析分离,Okenone系Car组分中常残留BPhe或BChl,色素提取液经皂化处理再进行硅胶柱层析,则可有效排除BChl和BPhe的干扰,大量制备Okenone和OH-R.g-ketoI。PPC分离纯化表明:Tween-80作为增溶剂,从283-1菌株中可分离得到结构完整且具有能量传递功能的LH2,分离的LH2在低温黑暗条件下很稳定。LDAO、Tween-80、Triton X-100和SDS均未分离得到LH1-RC,仍需要进一步研究。综上所述,本文提出了MPE积累能使菌体呈现421nm特征光谱的观点,为分析活细胞吸收光谱提供了可靠依据和新的思路。以Marichromatium sp.283-1为材料系统分析了该菌株积累的主要光合色素,并探讨了不同理化因子对其生长和光合色素合成的影响,弥补了产奥氏酮紫色硫细菌光合色素组分研究的不足,为其调控研究提供了材料。建立了一种绿色的Okenone系Car乙醇水提取工艺,为Car大量制备奠定了基础。初步探索了283-1菌株PPC的分离纯化条件,为开展含Okenone菌株PPC的相关研究奠定基础。