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硫酸长春新碱(vincristine sulfate，VCR)是由中药长春花Catharanthus roseus(L.)G.Don中提取的一种活性成分，是临床上治疗恶性淋巴瘤的一线药物。VCR口服吸收差，注射时漏于皮下可导致组织坏死、蜂窝织炎。与口服和经皮给药相比较而言，注射给药是较理想的途径，但仍具有较大的周围神经系统毒性。本文设计、制备了泊洛沙姆407(Pluronic F127)修饰的聚氰基丙烯酸正丁酯VCR纳米粒(F127-VCR-PBCA-NPs)，拟通过提高注射给药后VCR的淋巴靶向性，实现VCR治疗恶性淋巴肿瘤增效、减毒作用。具体研究内容如下：
建立了VCR体外含量测定的HPLC方法，考察了pH值(1～13)和温度(40～80℃)对VCR稳定性的影响。结果表明，pH值在2.0～9.0之间，VCR水溶液稳定性较好；温度对VCR水溶液稳定性影响不大。
在单因素考察的基础上采用星点设计-效应面法，以VCR，BCA和稳定剂F68/D-70加入量为因素，以VCR包封率、载药量、纳米粒粒径的总评归一值(OD值)为指标，优化VCR-PBCA-NPs的处方。F127-VCR-PBCA-NPs的最终处方和制备工艺为：分别称取处方量VCR、F68和D-70加水溶解，加0.1mol.mL-1的HCl调节溶液的pH值为2.5，在室温、磁力搅拌的条件下逐渐加入BCA，继续搅拌3h，加0.1mol.mL-1的NaOH溶液调节pH值至中性，经0.8μm微孔滤膜滤过，超速离心除去游离药物，再加入F127，继续搅拌1h，即得。
修饰后的载药纳米粒平均粒径变大(F127-VCR-PBCA-NPs为115.6 nm±2.24nm，VCR-PBCA-NPs为98.9nm±3.05nm)，Zeta电位变小(F127-VCR-PBCA-NPs为-0.16mV±0.04mV,VCR-PBCA-NPs为-14.6mV±1.58mV)。其原因可能是F127在纳米粒表面形成包衣层，以及做为一种非离子型表面活性剂对纳米粒子表面电性产生影响。F127修饰对VCR的包封率和载药量影响不大。
F127-VCR-PBCA-NPs冻干再复溶后粒径、多分散系数，Zeta电位，VCR包封率和载药量变化不大。体外释放结果表明，VCR溶液释放较快，4h基本释放完全；复溶后的纳米粒释放缓慢，4h的药物累积释放百分率为52.49％，12h的药物累积释放百分率为73.39%，其释放行为符合Higuchi，Q=0.1999t1/2+0.0105(r=0.9282)。
细胞生物学研究结果表明，与VCR溶液相比，修饰和未修饰的纳米粒均能促进体外培养的Raji细胞对VCR摄取，并且修饰纳米粒促进摄取效果更明显。采用激光共聚焦显微镜观察和流式细胞测定荧光探针(异硫氰酸荧光素，FITC)的荧光强度，结果表明体外Raji细胞与包载FITC的修饰、未修饰纳米粒孵育后对FITC均有明显的摄取。
大鼠体内的药物动力学和组织分布研究结果表明，与注射用硫酸长春新碱相比，F127-VCR-PBCA-NPs及VCR-PBCA-NPs给药后，均能明显延长VCR在大鼠体内的循环时间，增加AUC，降低清除率CL，且F127-VCR-PBCA-NPs效果更好。VCR-PBCA-NPs和F127-VCR-PBCA-NPs给药后，VCR在淋巴组织的分布均有增加，且F127-VCR-PBCA-NPs做为载体，增加更明显。VCR-PBCA-NPs给药后，对VCR被网状内皮系统摄取影响不大，而F127-VCR-PBCA-NPs给药后，VCR被网状内皮系统摄取显著下降。两种纳米粒对VCR在其他组织器官分布影响不大。
以荷人Burkitts淋巴瘤BALB/c-nu裸鼠为动物模型，对F127-VCR-PBCA-NPs进行药效学研究。结果表明：与生理盐水相比，F127-VCR-PBCA-NPs，VCR-PBCA-NPs和注射用硫酸长春新碱对肿瘤生长均有抑制作用，且F127-VCR-PBCA-NPs抑制效果最显著。
综上所述，本文制备了具有良好淋巴靶向特征的F127-VCR-PBCA-NPs，为治疗恶性淋巴肿瘤的VCR靶向制剂的开发奠定了基础。