2,2',忆4,及4'-四溴联苯醚(BDE-47)对成年雄性斑马鱼神经行为和记bcl-2,c-fos,grin1b和lingo1b基因表达的影响

来源 :汕头大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanyanwei
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目的与背景:多溴联苯醚(PBDEs),作为一种持久性有机污染物,广泛存在于我们的生活环境中,对生态环境及人类健康造成一定的危害。现阶段研究表明,PBDEs可通过干扰机体甲状腺素和雌激素的分泌对甲状腺和生殖系统产生影响;同时,PBDEs还具有一定的神经毒性。然而,关于PBDEs对神经行为,如学习及记忆等的影响及其相关机制的研究还是比较有限的。我们利用斑马鱼生物模型探究PBDEs对雄性斑马鱼神经行为和记忆及相关基因表达水平的影响。  材料和方法:实验动物:AB品系成年雄性斑马鱼(4-5个月大)。实验方法:(1)T-迷宫探索阶段。将斑马鱼放置于T-迷宫中以熟悉迷宫环境,每天约1小时,持续一周;(2)迷宫学习阶段。在目标区域内放置食物、石头、水草等模拟斑马鱼喜爱的环境,以诱导斑马鱼能快速地从开始区域到达目标区域,且在目标区域放置一块红色塑料板作为颜色刺激,每天1小时,持续一周;(3)暴露、测试及分析阶段。迷宫学习阶段结束后,紧接着BDE-47暴露及行为测试阶段,将斑马鱼分为五组,每组10条鱼,随机暴露于0、10、50、100、500μg/LBDE-47溶液中(0.05%DMSO),每7天进行一次行为测试,用摄像机记录测试结果并导入斑马鱼行为分析系统进行各项参数的分析。相关参数:在开始区域停留的时间、到达目标区域的时间、在目标区域停留的时间、出现游动停滞的次数等。BDE-47暴露实验21天后,提取斑马鱼大脑组织总RNA分析c-fos,bcl-2,lingo1b和grin1b的mRNA表达水平变化。  结果:行为学的改变,如在开始区域停留的时间、到达目标区域的时间、在目标区域停留的时间、出现游动停滞的次数,与暴露浓度存在剂量-反应关系,并与暴露时间,存在时间-效应关系。实时荧光定量PCR结果显示,随着BDE-47浓度的增加,bcl-2,grin1b和lingo1b基因的mRNA表达水平上升。c-fos基因在高剂量组表达水平明显高于低剂量组。  结论:BDE-47可对成年雄性斑马鱼的神经行为产生不良的影响,主要表现为到达目标区域所用时间及正确通道选择比例的减少,反映其记忆力的受损;同时,可影响大脑组织中神经损伤修复基因(c-fos,bcl-2,lingo1b和grin1b)的mRNA表达水平。
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