氨碘肽对IL-1β诱导HRPE细胞增殖及IL-8表达的影响

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:z344121483
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目的:研究氨碘肽注射液(Amiotide Injetion)对重组人白介素-1β(IL-1β)诱导的人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelium cell,HRPEC)增殖及炎性细胞因子白介素-8(interleukin-8,IL-8)表达的影响,为氨碘肽注射液在临床上的抗炎、抗变性作用提供理论依据。  方法:1、体外培养HRPEC,采用传代的3~5代细胞。2、细胞活性检测(CCK-8)法检测IL-1β对HRPEC增殖的影响实验分2组:对照组(HRPEC)和模型组(HRPEC+IL-1β);模型组按IL-1β浓度的不同分为0.5、5、50μg/L3组,IL-1β干预时间为6、12和24 h。3、酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-1β对HRPEC表达IL-8的影响实验分2组:对照组(HRPEC)和模型组(HRPEC+IL-1β);模型组按IL-1β浓度的不同分为0.5、5、50μg/L3组;IL-1β干预时间为6、12和24 h。4、氨碘肽对HRPEC的毒性实验分2组:对照组(HRPEC)和治疗组(HRPEC+氨碘肽),治疗组按氨碘肽浓度的不同分为25、50、100、200、400μg/L5组,以上各组实验时间均为48 h。5、CCK-8法检测氨碘肽对IL-1β诱导HRPEC增殖的影响实验分2组:对照组(HRPEC+IL-1β)和治疗组(HRPEC+IL-1β+氨碘肽),其中IL-1β浓度为5μg/L,治疗组按氨碘肽浓度的不同又分为25、50、100、200、400μg/L5组,以上各组IL-1β和氨碘肽均作用24 h。6、ELISA法检测氨碘肽对IL-1β诱导HRPEC表达IL-8的影响实验分4组:空白对照组(HRPEC)、对照组(HRPEC+氨碘肽)、模型组()和治疗组(HRPEC+IL-1β+氨碘肽),对照组氨碘肽浓度分别为200,400μg/L,治疗组分IL-1β+氨碘肽200μg/L和IL-1β+氨碘肽400μg/L2组,模型组及治疗组IL-1β浓度为5μg/L,IL-1β和氨碘肽均作用24 h。  结果:1、体外培养的HRPEC贴壁生长良好。2、IL-1β对体外培养的HRPECs增殖的影响为:同一作用时间,IL-1β诱导的HRPECs增殖随IL-1β浓度的增加而增多,但浓度为50μg/L的IL-1β对HRPEC增殖无影响;同一浓度,IL-1β的作用时间越长,HRPEC增殖越明显。3、IL-1β对体外培养的HRPEC表达IL-8的影响为:IL-1β促HRPEC分泌IL-8的量随IL-1β浓度的增加而增多,当浓度达到50μg/L时,IL-8的量出现高峰平台期;同一浓度,HRPEC分泌IL-8的量随时间延长而增加。4、氨碘肽对HRPEC的毒性实验为:25~400μg/L氨碘肽处理HRPEC48 h后,与对照组相比无明显差异,对细胞无明显毒性作用(P>0.05)。5、氨碘肽对IL-1β诱导HRPEC增殖的影响为:预先加入氨碘肽处理后,可使IL-1β诱导的HRPEC增殖减少,治疗组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),并且存在剂量依赖性。6、氨碘肽对IL-1β诱导HRPEC表达IL-8的影响为:预先加入氨碘肽处理后,可使IL-1β诱导HRPEC分泌IL-8的量减少,治疗组与空白对照组相比差异有显著性(P<0.01),并且存在剂量依赖性。  结论:1、IL-1β可诱导HRPEC建立细胞炎症模型。2、IL-1β可诱导HRPEC增殖和IL-8表达增加。3、氨碘肽对IL-1β诱导的HRPEC增殖和IL-8表达增加有保护作用。
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