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[目的]腹膜透析(Peritoneal Dialysis,PD)作为终末期肾脏病(end-stage renal disease,ESRD)患者重要的透析方式之一,由于其价格低廉、操作简便、对血流动力学影响小、能较好的保护残肾功能等优点,已成为越来越多ESRD患者首选的肾脏替代治疗方式。但令人遗憾的是随着透析时间的延长,PD的透析效能逐渐下降,导致超滤衰竭(ultrafiltration failure,UFF)的发生,UFF是PD技术失败的主要原因及阻碍PD进一步发展的主要障碍。UFF发生的本质是腹膜纤维化(Peritoneal Fibrosis,PF),PF严重影响着PD患者的生活质量和长期存活率,且临床上尚无有效的治疗方法。阐明PF的发病机制以及探索保护腹膜结构完整性的策略已成为肾脏替代治疗(Renal replacement therapy,RRT)领域面临的重大挑战。腹膜间皮细胞发生上皮间质转化(epithelial Mesenchymal transition,EMT)被认为是PF的早期可逆的重要病理生理过程。因此,如果能够在起始阶段干预腹膜间皮细胞EMT将有可能为抑制甚至逆转PF提供新的策略。目前EMT成为研究热点,但腹膜间皮细胞EMT的分子机制仍未阐明。近年来一些研究发现热休克蛋白(Heat shock protein,HSP)在EMT过程发生中扮演了重要的角色,但HSP与腹膜间皮EMT的关系,目前尚未见相关研究。近期有研究提示,HSP27可以通过提高STAT3磷酸化水平,参与细胞内JAK/STAT3信号通路的激活,稳定转录因子Snail的表达,从而参与维持前列腺癌细胞EMT的发生。为此,本课题组通过建立腹膜透析动物模型,以靶点蛋白HSP27为切入点,观察HSP27在大鼠腹膜EMT组织中的表达,探讨HSP27与腹膜EMT的关系,并探寻其下游JAK/STAT3/Survivin通路在腹膜EMT过程中的作用,寻找一些参与腹膜间皮EMT的蛋白并对其相关分子机制进行探索。[方法]1.取40只正常SD大鼠,适应性喂养一周,随机分为四个组:对照组、透析2周组、透析4周组、透析6周组,其中透析组每日予4.25%PD液(100mL/kg)腹腔注射,对照组每日予等量的0.9%NS腹腔注射;2.各组SD大鼠分别于2、4、6周后处死,行腹膜平衡实验,评估腹膜功能;3.取各组SD大鼠腹膜组织行HE染色及Masson染色,使用光学显微镜观察腹膜组织形态学;4.q-PCR检测EMT标志物(上皮表型E-cadherin、间质表型N-cadherin)及HSP27 mRNA的表达;5.免疫组化检测EMT标志物(上皮表型E-cadherin、间质表型N-cadherin)、及 HSP27、P-STAT3、Survivin 蛋白的表达;6.Western Blot检测EMT标志物(上皮表型E-cadherin、间质表型N-cadherin)及 HSP27、P-STAT3、STAT3、Survivin 蛋白的表达。[结果]1.透析组大鼠腹膜超滤量较对照组明显降低,且随着透析时间延长,超滤量降低更为显著,差异具有统计学意义(p<0.01)。以上指标改变更为显著2.透析组大鼠小分子溶质转运率较对照组明显升高,且随着透析时间延长,超滤量升高更为明显,差异具有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。3.HE、Masson染色显示:对照组腹膜间皮层光滑连续,间皮下基质层薄而致密,透析组腹膜间皮层脱落,间皮下基质层大量胶原沉积,伴炎性细胞浸润及新生血管形成,呈现PF状态,且透析时间越长,PF程度越严重,腹膜厚度增加越显著,各组间具有统计学意义(p<0.01)。4.RT-PCR显示:透析组大鼠腹膜组织中上皮标志物E-cadherin mRNA相对表达量较对照组明显降低,且透析时间越长,降低越显著(p<0.05或p<0.01);透析组间皮标志物N-cadherin mRNA相对表达量较对照组明显升高,且透析时间越长,升高越显著,各组间进行两两比较差异具有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。5.免疫组化显示:透析组大鼠腹膜组织中E-cadherin蛋白表达量较对照组明显较少,且随着透析时间延长,减低越显著,各组间进行两两比较差异具有统计学意义(p<0.05 或p<0.01);N-cadherin、HSP27、P-STAT3、Survivin蛋白在透析组大鼠腹膜组织中高表达,且随着透析时间的延长,表达量增高越显著,各组间进行两两比较差异具有统计学意义差异有统计学意义(p<0.05)。6.Western Blot、免疫组化显示:透析组大鼠腹膜组织中E-cadherin蛋白表达量较对照组明显较少,且随着透析时间延长,减低越显著,各组间进行两两比较差异具有统计学意义(p<0.05或p<0.01);N-cadherin、HSP27、P-STAT3、Survivin蛋白在透析组大鼠腹膜组织中高表达,且随着透析时间的延长,表达量增高越显著,各组间进行两两比较差异具有统计学意义差异有统计学意义(p<0.05或p<0.01);STAT3在各组中的表达无明显差异(p>0.05)。[结论]1.高糖腹透液可致大鼠腹膜结构及功能受损,并呈时间依赖性;2.高糖腹透液可诱导大鼠腹膜间皮细胞发生EMT转变;3.大鼠腹膜间皮细胞EMT的发生可能与HSP27蛋白及mRNA表达上调有关;4.EMT的发生与JAK2/STAT3信号通路的激活有关;5.Survivin蛋白在大鼠腹膜EMT模型中高表达,并呈时间依赖性。