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苹果在我国水果产业中占据重要地位,但在其生长过程中不可避免的受到干旱和盐胁迫等逆境因素的影响。据报道,bZIP家族转录因子与非生物胁迫密切相关。课题组前期已对苹果MdbZIP26基因进行初步功能研究,结果表明该基因可能通过ABA介导的信号转导途径来提高植物对干旱和盐胁迫的抗性。为了进一步阐明MdbZIP26基因的功能以及对非生物胁迫的响应机制。本文对MdbZIP26基因进行亚细胞定位和自激活活性验证,对其转录后潜在的磷酸化修饰位点进行预测分析。利用实时定量PCR法分析MdbZIP26的组织表达模式。同时,从富士苹果叶片中分离MdbZIP26基因启动子,将其与pCanbia1391Z-GUS载体连接后遗传转化拟南芥植株,进一步分析MdbZIP26在时间和空间上的表达模式。此外,利用生物信息学技术分析MdbZIP26启动子区的顺式作用元件,并对MdbZIP26启动子进行缺失表达分析。获得的主要结果如下:1、MdbZIP26亚细胞定位结果表明MdbZIP26定位于细胞核中。酵母自激活活性验证结果显示MdbZIP26具有转录自激活活性,但其自激活活性能够被200ng/ml的AbA抑制。说明MdbZIP26具备转录因子的特性。2、MdbZIP26基因在苹果中的组织表达模式分析表明MdbZIP26基因在苹果茎、叶、花、果实和种子中均有表达,其中,在种子中的表达量最高,而在茎中的表达量最低。3、将MdbZIP26基因启动子稳定表达于拟南芥中,研究MdbZIP26基因的时空表达模式的结果表明,在不同的生长阶段,MdbZIP26启动子驱动GUS的表达也有所不同。正常条件下,在转基因拟南芥生长至2、5、7d时,分别于胚根和胚轴中呈现较低GUS组织染色活性,但在子叶中几乎观察不到GUS组织染色活性;在生长4 d和3周时,转基因植株的各组织中均有微量的GUS表达;在成熟转基因拟南芥的花(花药除外)和果荚基部均表现较高的GUS活性。在胁迫和ABA处理后,各个生长时期的转基因拟南芥的GUS组织染色活性均较对照增强。其中,在子叶、根、叶维管组织和保卫细胞中的GUS活性被显著促进。4、MdbZIP26基因的启动子生物信息学分析表明,MdbZIP26基因启动子区含有ABRE、G-box、DRE、GT1GMSCAM4等顺式作用元件,可能参与响应ABA和渗透胁迫。MdbZIP26基因启动子缺失表达结果表明,在-1314bp~-1061bp区的ABRE和DRE元件可能对干旱和ABA的响应起着关键作用。另外,在-1061bp~-766bp的盐响应元件可能主要参与盐胁迫的响应。