论文部分内容阅读
本研究从广东、福建、广西等主要养鸭地区以鸭传染性浆膜炎为主要特征的57次病例近300份病料中共分离鉴定得到55株鸭疫里默氏杆菌(Riemerellaanatipestifer，RA)，其中2株分离自鹅，其余53株均分离自鸭。流行病学调查结果表明，感染鸭日龄多为2～6周龄，并有大日龄发病的趋势。剖检病变以心包炎、肝周炎以及全身性败血性病变为特征，病原菌从病死鸭的脑组织中较易分离到，在肝脏、脾脏及血液中的分离率次之。
生物学特性研究表明，该菌在普通营养琼脂平板上不生长，在改良琼脂平板上，烛缸中，37℃培养24～48h后可形成微凸起、边缘整齐、透明有光泽的奶油状光滑型菌落，无溶血现象，菌落无色素，直径1～2mm，在麦康凯培养基上不生长。在改良肉汤中长成上下一致的轻微浑浊，久置可见上清下浊，试管底部有沉淀。有些菌株在改良肉汤培养基中振荡培养24h后呈上下一致的轻微浑浊，但静置一段时间后在培养基表面可见薄膜的形成，且该薄膜不易摇散。本菌在振荡培养条件下可在13h时达到活菌数高峰，无明显的平台期。
对消毒药敏感性试验结果表明，该菌抵抗力不强，各血清型代表株对生产上常用的甲醛、过氧乙酸、氢氧化钠、新洁尔灭和苯酚等环境消毒药敏感，绝大多数消毒药的杀灭效果显著。
生化试验结果表明绝大多数菌株都不发酵碳水化合物，有些菌株可发酵葡萄糖、木糖和蔗糖，不分解尿素，不产生硫化氢，不产生吲哚，不还原硝酸盐，氧化酶阳性，能液化明胶，V-P和M.R.试验阴性。
采用Kirby-Bauer(纸片扩散法)对所分离的鸭疫里默氏杆菌进行药物敏感性试验，菌株对生产上常用药物如上述两表中的氨苄青霉素、卡那霉素、庆大霉素和利福平等已严重耐药；菌株间对药物的敏感性差异很大，只有个别菌株对个别药物如环丙沙星、诺氟沙星、呋喃唑酮等敏感。
玻片凝集试验和试管凝集试验结果表明，所分离得到的55株鸭疫里默氏杆菌包含8个血清型，命名为SCAU1～8型，其中SCAU1、SCAU2、SCAU3和SCAU4为华南地区的优势血清型。
在流行病学调查的基础上，选择华南地区流行广泛的鸭疫里氏杆菌(RA)SCAU1、SCAU2、SCAU3和SCAU4血清型菌株制备蜂胶佐剂四价灭活疫苗。对疫苗经无菌检验及安全检验合格后，给3日龄樱桃谷商品鸭每只颈背皮下注射0.5mL，3周后免疫鸭对同源RA的攻击表现出11/13～13/13免疫保护力，对异源RA的攻击保护力弱，为1/13～3/13，有一定的交叉保护性。
玻片凝集试验监测凝集抗体动态变化的统计结果表明，凝集抗体的检出率随灭活疫苗免疫后时间的增长而提高至免疫后7周，检出率可达100％。
微量凝集试验结果表明，蜂胶佐剂灭活疫苗能迅速刺激机体产生凝集抗体，油佐剂灭活疫苗能缓慢刺激机体产生凝集抗体的产生，并能使凝集抗体在较长时间保持较高水平。对鸭只多次免疫后监测其凝集抗体变化结果表明，第一次免疫可刺激机体产生凝集抗体峰值，后续免疫均无法达到该峰值。
用间接ELISA对免疫鸭进行抗体消长规律检测，表明3日龄樱桃谷鸭首免后3周抗体达到高峰，至11周龄时仍能检出抗体；首免后2周时进行二免后可产生更高的抗体水平，到9周时仍能保持较高抗体水平。经攻毒保护试验、抗体消长规律测定，证明研制的鸭疫里默氏杆菌蜂胶四价灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性，能有效预防鸭疫里默氏杆菌病的发生。