副溶血弧菌重要外膜蛋白免疫保护原性研究

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maly_soly
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弧菌是海洋环境中最常见的细菌类群之一,它属于革兰氏阴性菌,分布广泛,大部分为人畜共患的致病菌,对水产养殖造成巨大的危害。其中副溶血弧菌是当前危害最为严重的一种,引起了全世界的关注,是目前研究的热点。近年来的研究证明革兰氏阴性菌外膜蛋白具有免疫原性,可成为研制开发防治弧菌病的亚单位疫苗候选靶位。因此本论文试图通过对副溶血弧菌部分外膜蛋白的免疫原性进行较为系统的评价,筛选出强保护性抗原,为亚单位疫苗的研制开发奠定基础。 试验以副溶血弧菌的基因组为基础,对17种外膜蛋白进行基因克隆、表达,蛋白纯化和抗血清制备。在此基础上,与实验室已有的18种克隆及其抗血清进行以下2方面的工作:1)对斑马鱼进行被动免疫评价,获得候选者;2)对候选者采用昆明鼠对进行主动免疫评价。 通过对斑马鱼进行被动免疫试验,初步评价了35种副溶血弧菌外膜蛋白抗血清的免疫保护作用。结果发现有11种蛋白的血清免疫保护率达到或高于60%,分别是:VP0887(73.3%)、VP1019(73.3%)、VP1260(60%)、VP2309(80%)、VPA0548(73.3%)、VP1267(60%)、VPA1745(66.7%)、VPA0731(60%)、VP1667(93.3%)、VP2369(73.3%)、VP1671(66.7%)。将免疫保护率在60%以上的VP0887、VP1019、VP2309、VPA0548、VPA1745、VP1667、VP2369、VP1671以斑马鱼为动物模型对溶藻弧菌、荧光假单胞菌和嗜水气单胞菌进行交叉免疫保护作用的评价。通过系统的免疫评价筛选获得可作为研制开发亚单位疫苗候选靶位的VP2309、VP2369、VP1667三种副溶血弧菌外膜蛋白保护原。这些结果为控制弧菌感染的免疫学防治具有十分重要的意义。
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