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本研究通过培养两株重组大肠杆菌表达人干扰素α2b(Human Interferon α2b,hIFNα2b)。
其中大肠杆菌BL21(pBAI)采用PL启动子通过升温诱导表达hIFNα2b,本研究比较了分批培养和多种补料分批培养方式下hIFNα2b的生产。其中通过恒速流加葡萄糖,hIFNα2b的表达量达到6540 mg/L,超过目前已知文献报道的水平。通过流加有机氮源,提高了诱导前后菌体比生长速率,加快了hIFNα2b的合成速率,平均生产速率高达1006mg/L/L,hIFNα2b对有机氮源的得率提高到138 mg/g。
大肠杆菌YK537(pYAIT10)采用phoA启动子在低磷条件下诱导表达hIFNα2b。37℃分批培养时表达水平达到1300 mg/L,但hIFNα2b以包涵体形式存在。考察了改变碳源、降低温度、改变培养pH、控制溶氧、改变渗透压、添加甘氨酸、乙醇、Tween-20等条件对hIFNα2b的分泌的影响。在以甘油为碳源的摇瓶实验中,有7.1 mg/L的hIFNα2b分泌到周质空间中,占hIFNα2b总表达量的12%。