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目的：分离、培养扩增BMSCs并高效诱导其成为神经干细胞，初步探讨BMSCs源NSCs移植治疗大鼠局灶性脑缺血的可行性。
方法：
1．细胞培养：采用密度梯度离心法分离出BMSCs，在DMEM培养基中培养。第4代BMSCs的培养基中加入BDNF20ng／ml、RA20ng／mI分化处理3天。对诱导转化细胞行Nestin免疫细胞化学染色。
2．实验动物分组：32只健康SD大鼠随机分为假手术组(8只)、缺血对照组(8只)、缺血BMSCs移植组(8只)和缺血BMSCs源NSCs移植组(8只)，采用线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型。
3．细胞移植：用终浓度为10ug／ml的BrdU标记第4代培养的BMSCs和NSCs。标记3天后调细胞浓度为3×10。／ml供移植用。在术后1 d，将1ml BMSCs经尾静脉注射入缺血BMSCs移植组大鼠体内，1mI NSCs注射入缺血BMSCs源NSCs移植组大鼠体内，1mI PBS注射入缺血对照组大鼠体内，假手术组不做任何移植。
4、行为学检测：于术后1d、7d、14d、21d、28d分别用Chen的NSS量表对大鼠的神经功能评分。
5、组织学检查：各组动物随机分为为2个亚组，分别于术后14d、28d行脑灌注固定取材。相邻切片分别采用免疫组化SABC法检测：Brdu、Nestin阳性细胞，TUNEL法检测凋亡细胞。
结果：采用密度梯度离心法成功分离出BMSCs，诱导转化细胞Nestin阳性率达 (86.15±4.58)％，表明这些转化细胞具有神经干细胞性质；BMSCs源NSCs移植组在各时点的的神经功能康复均优于BMSCs组(P<0.05)和对照组(P<0.01)，且4w时神经功能恢复明显优于2w时(P<0.05)；BMSCs移植组和BMSCs源NSCs组在缺血边缘区均能检测到BrdU汞Nestin阳性细胞，但BMSCs源NSCs移植组的阳性细胞数多于BMSCs组和对照组(P<0.01)。BMSCs源NSCs移植组术后28d时缺血边缘区的凋亡细胞数明显少于其他各组(P<0.01)。
结论：
1.BMSCs可在体外大量培养扩增，并在BDNF和RA的诱导下转化为神经干细胞。
2.BMSCs源NSCs经静脉途径移植入缺血大鼠体内后，可在脑内迁移、存活。
3.BMSCs源NSCs较BMSCs移植更有助于改善脑缺血后的神经功能，抗凋亡作用可能为其神经保护机制之一。