红莲型CMS近等基因恢复系及同核异质不育系的构建

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细胞质雄性不育(Cytoplasmic male sterility,CMS)是杂交水稻生产应用中的主要种质资源。红莲型水稻细胞质雄性不育(HL-CMS)是主要的水稻CMS类型之一,orfH79和orf216是导致HL-CMS的两个不育基因。HL-CMS育性恢复受两对基因控制,分别为Rf5和Rf6。本实验对HL-CMS相关的两对不育基因和育性恢复基因进行了研究,取得如下结果:  1)通过YTA/9311杂交、YTA//YTA/9311多轮回交及分子标记辅助选择相结合,构建了仅含其中一个恢复基因(Rf5或 Rf6)和含两个恢复基因(Rf5-6),并与YTA同质同核的3种近等基因恢复系L-Rf5、L-Rf6和L-Rf5-6。  2)通过含有orf216和orfH79两个不育基因、仅含有orfH79和仅含有orf216基因可能具有HL-CMS特异性的三类材料作母本与HL-CMS保持系YTB进行杂交及回交,构建了与YTA(L-orf216-H79)同核异质不育系L-orf216。  3)通过体外转录技术,获得了细胞质雄性不育基因orf216和orfH79各自的RNA,经检测orf216 mRNA浓度为1.286μg/μL,A260/A280为2.01;orfH79 mRNA浓度为1.006μg/μL,A260/A280为2.10。
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