集胞藻6803NADPH脱氢酶活性超复合体的鉴定、调节与功能

来源 :中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hengheng5251984
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蓝藻细胞中,现已鉴别出几种NADPH脱氢酶(NDH-1)复合体,它们参与呼吸、围绕光系统I的循环电子传递以及CO2吸收等过程。最近研究发现蓝藻细胞NDH-1的酶活在生育期间发生了明显变化,对数期细胞NDH-1的活性最高。   本研究以对数期集胞藻6803(Synechocystis sp.strain PCC 6803)细胞为材料,通过非变性凝胶电泳分离经n-dodecyl-β-maltoside(DM)处理的集胞藻6803的类囊体膜,再通过NADPH-氮蓝四唑(NBT)氧化还原酶活性染色和免疫印迹成功鉴别到两种NDH-1活性复合体。基于分子量的大小,把它们分别命名为Act-NDH-1Sup(Active Super-complex;1,000kDa)和Act-NDH-1M(Active Medium-complex;380 kDa)。与Act-NDH-1M相比,Act-NDH-1Sup是一种具有高氧化NADPH活性的超复合体。文章认为,Act-NDFH-1Sup和Act-NDH-1M可能分别是带有活性亚基的NDH-1L(large size)二聚体和NDH-1M(medium size)。   低CO2诱导Act-NDH-1M酶活的增加,而使Act-NDH-1Sup的酶活受抑制;外源葡萄糖使Act-NDH-1Sup的亚基表达与酶活均下调,但对Act-NDH-1M的则无明显影响。这表明两种NDH-1活性复合体对环境因子改变的响应是不同的。外源葡萄糖/敌草隆引起plastoquinone(PQ)库的还原/氧化,导致Act-NDH-1Sup的表达与酶活显著下/上调,指出PQ库氧化还原势的变化调节Act-NDH-1Sup的表达与酶活。这是首次在蓝藻细胞中发现存在一种氧化还原调节NDH-1复合体表达与活性的机制。反向遗传学分析表明,Act-NDH-1Sup对蓝藻的呼吸及围绕光系统I的循环电子传递是必需的,而Act-NDH-1M则参与CO2的吸收。藻胆体(PBS)是蓝藻主要的捕光天线色素复合体,其移动可以影响光能在两个光系统间的分配,本研究证实,PBS向光系统Ⅰ/光系统Ⅱ的移动可以使蓝藻细胞中Act-NDH-1Sup介导的围绕光系统I的循环电子传递增加/减少与呼吸减少/增加。此外的研究还发现,Act-NDH-1Sup在集胞藻6803中的存在是弱光下细胞存活所必需的,但具体作用机制尚需进一步研究。
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