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目的:急性肺损伤(acute lung injury,ALI)目前仍是临床诊疗所面临的一大挑战;其发病急骤,对机体损伤大,甚至会危及生命,而其发生机制不清,且有效治疗手段欠缺,使得急性肺损伤的研究颇具临床意义。资料显示,急性肺损伤属于急性炎症反应过程,因此,多种炎症因子在急性肺损伤的患者中异常表达。研究表明,骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在肺损伤治疗方面有着重大潜在价值,因此关于急性肺损伤的基础研究和临床应用研究逐渐成为目前国内外学者关注的热点之一。据此,本研究采用幼年鼠雾化吸入脂多糖(LPS)制备急性肺损伤动物模型,并应用骨髓间充质干细胞进行干预,探讨BMSCs对急性肺损伤幼鼠炎症因子IL-1β、IL-10的影响,进而为MSCs治疗应用于临床提供相关实验室证据。研究方法:本研究以SPF级雄性SD幼年鼠(72只)为研究对象,再按随机数字表将幼鼠随机分为3组:空白对照组、疾病模型组(模型组)、疾病模型+MSCs(治疗组),每组各24只;各组随机分为6h、12h、24h、48h共4个亚组,每组6只。模型组及治疗组雾化吸入LPS(5mg/ml,吸入剂量为2ml,共持续吸入20min)建立幼年鼠ALI模型,对照组同期雾化吸入等容积生理盐水,1h后,治疗组经尾静脉注射BMSCs(1×10~7/kg,1×10~7/ml),模型组、对照组经尾静脉注射等体积培养基(DMEM)。HE染色组织切片观察肺组织病理形态变化,检测肺组织W/D比值和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中性粒细胞计数及蛋白质含量,并通过免疫组织化学法及免疫印迹法检测肺组织IL-1β、IL-10的含量的变化,对MSCs通过多种途径抑制炎症反应、减少肺组织损伤的作用机制进行论证。结果:与对照组、治疗组相比,模型组各个时间段的BALF中性粒细胞数量、总蛋白的含量、肺组织W/D比值均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);经MSCs给予干预后,在12h节点开始,BALF中性粒细胞数量和总蛋白含量较相应时间点肺损伤组明显下降,有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学观察显示:模型组肺组织呈现典型的炎症病理变化,包括肺泡充血、出血、水肿,肺泡腔和血管壁中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚等肺损伤性病变;治疗组肺组织损伤程度明显减轻。模型组、对照组、治疗组血清中的IL-1β和IL-10含量在不同时间段均呈降低状态,48h时段与6h时段存在显著差异,具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色后,光镜下可见模型组幼年鼠6h、12h、24h、48h肺组织IL-1β蛋白大量表达于肺泡上皮细胞胞浆及细胞壁上;而治疗组蛋白表达强度明显下降。Western blot结果分析,与对照组、治疗组相比,模型组各个时间段的肺组织IL-1β、IL-10蛋白含量均明显较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。IL-1β、IL-10在各模型组和治疗组的表达呈现先升高后降低的趋势,其中IL-1β在12h升高最为显著;IL-10在24h升高最为显著。IL-10在48h后表达明显降低,其中在治疗组的下降最为明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞可对急性肺损伤幼鼠炎症因子IL-1β、IL-10产生重要影响,LPS致ALI的发病机制可能与IL-1β、IL-10表达升高有关。应用BMSCs干预后,ALI幼年鼠的肺组织损伤减轻,并且IL-1β、IL-10蛋白表达较模型组显著降低,提示BMSCs能够减轻ALI肺组织的炎症反应并参与了肺组织损伤的修复。可将这一论据作为儿童ALI/ARDS临床治疗的重要依据,对于后期治疗研究工作具有重要的研究意义。