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为探索虫生真菌和细菌两种重要杀虫微生物应用的新途径,延长药效期,提高防治效果,改善两种药剂在自然界中易受紫外线损伤的缺陷,本实验配制出细菌和真菌的12种复合乳剂、10种复合粉剂,并通过大量对其生物活性和杀虫毒力的测定,筛选出2-3种对紫外线等环境因子敏感性低、作用速度快、杀虫效果好、残效期长的乳剂配方和粉剂配方。同时从烟青虫蛹上分离出具有高致病力的青霉菌,对该菌的生物学和生态学特征进行了探讨。 1 杀虫真菌的生物学和生态学研究 虫生真菌青霉菌适宜于低温生长、生命力强,在生长过程中,菌落具有从白色至灰色、粉色,最终形成绿色四种颜色变化的真菌。分生孢子球形,绿色或黄色。在15℃、25℃、35℃三个温度条件下,以15℃生长最为旺盛,25℃次之,35℃条件下几乎不生长而后死亡。在SDAY和PDA两种培养基上,以SDAY培养基上生长较为迅速,但在PDA培养基上产孢迅速而且产孢量大。用菌液接种法比用菌粉接种法生长势好。青霉菌在25℃、SDAY培养基上用菌液接种法接种,菌落日平均增长量达0.67cm/d。青霉菌在培养液中培养,由于形成酸性物质,培养液pH值降低,颜色变浅,生长势为白僵菌5S03>青霉菌P.s>绿僵菌Ma4,但青霉菌的产孢量大。设计了四种粗培养料配方,观察青霉菌的生长情况,得出:青霉菌在四种培养料中的生长速度依次为:D(麦麸:玉米粉:马铃薯滤液——4:1:4)>B(麦麸:马铃薯滤液——5:1)>A(麦麸:玉米粉——5:1)>C(麦麸:玉米粉:马铃薯滤液——4:1:1)。 2 几种真菌对害虫的毒力 用青霉菌感染桃蚜和棉铃虫2龄幼虫,与其它真菌的致死中时相比,四种真菌对桃蚜的作用速度依次是P.s>5S03>Ma4>Nr96-1。用六种真菌对棉铃虫2龄幼虫的处理,作用速度依次是5S03>B-9-9>P.s>Nr96-1>Ma4>Ma3。用各真菌对桃蚜的致死效果进行相关分析,可得出Ma4与5S03对桃蚜的致死率最高,P.s对桃蚜的作用效果最不理想,与Ma4形成显著性差异。对棉铃虫2龄幼虫,5S03致死率最高,P.s次之,Ma4最低,P.s与5S03、Ma4都有显著性差异,杀虫效果处于中等水平。综合分析,选定5S03、P.s与细菌配制复合剂型。 3 细菌和真菌复合乳剂的检测与评价 分别将青霉菌Ps、白僵菌5503和苏云金杆菌Bt乳剂相混合,加入其它乳化剂和保护剂,共配制成12种复合乳剂。分别在贮存一个月、四个月、一年后的三个阶段,对其中的微生物活性成分进行检测,对两种目标害虫进行毒力测定,测得:在各个阶段,细菌和真菌活性比前一个阶段都有所下降。a、A复合乳剂中细菌的活性下降最多,B、E、e、f细菌的活性保持最为良好,D、Fb、c细菌的活性也比较高。真菌活性下降最多的是A、E、F、e,一年以后真菌几乎全部死亡。C、D、E、C、f中仍有部分真菌存活。各乳剂在各阶段对目标害虫的毒力均有所下降,乳剂保存一个月时,对桃蚜的毒力都比较高,致死速率快,平均死亡率均超过Bt原液的作用效果或与Bt原液相差无几。一年后,A、。对蚜虫的毒力下降最多,其中。与其它的*s复合乳剂之间有显著差异。A、a均为没有添加任何辅助成分的细菌和真菌的混合液,说明各复合乳剂的添加成分均增强了复合乳剂对桃蚜的致病力。在对棉铃虫的毒力测定中,一个月时,B毒力下降最多,与其余各乳剂成极显著差异。说明复合乳剂B中的辅助成分严重削弱了对棉铃虫幼虫的毒力作用,不利于真菌和细菌药剂的发挥。四个月后,b毒力下降最为显著,与其余巩剂有显著差异,说明b虽然在一个月时对棉铃虫有较高的毒力,但到四个月时毒力己显著下降,因而它只能作为细菌和真菌复配时短期使用的配方选择,长期贮存,尤其是夏季高温天气的长期贮存,对药效的性能影响较大。一年后,各乳剂之问的毒力水平己相差不大,多种乳剂的颜色都变浅,保护剂的作用衰退,对棉铃虫2龄幼虫的平均死亡率维持在70%左右。最终筛选出对桃蚜和棉铃虫效果最好,性状最优,同单用细菌和真菌相比,有明显增效作用的乳剂的E、F,它们的配方分别是:E一【5503(0二s)+ Bt乳剂(20ml)十乳化齐 2(30m)+罕化齐 二添加剂(0*olsg)+保护剂3(0*sg)]F一[5503(0.Zg)+Bt乳剂(20ffil)+乳化齐3(30ffil)十保护齐1(0.059)]E、F对桃蚜、棉铃虫幼虫都有较强的杀伤力,受外界环境的影响较小,适且长期贮存,因而这两个配方组合对5503、PS、Bt乳剂都有较好的保护作用,并且利用各成分共同发挥作用,提高了杀虫效果。4 细苗和真菌复合粉剂的检副与评价 10种复合粉剂在贮存半年后,对其中的活性成分进行检测,对目标害虫进厅毒力测定,测得E;细菌活性降低最多,a;、c;、d;、e;的真菌活力最低。各粉剂对桃蚜没有明显的增效作用,d;对桃蚜的致死率最低,与Bt原粉和其它复合粉剂有显著差异。在对棉铃虫的毒力测定中,E;、b;的毒力下降最多,与其余粉剂间有显著差异。c;、人略有增效作用,c;和4的配方分别是:c;一【Rs(0.ig)十 Bt粉齐(10g)十罕化齐 1(ig)+保护齐 2(ODlg)]d;一IPS(0.ig)+ Bt粉