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目的:探讨超声造影(Contrast-enhanced Ultrasound,CEUS)参数在兔下肢骨骼肌缺血后再灌注4小时内不同时间点的变化特点。方法:新西兰大白兔22只,全身麻醉后,通过耳缘静脉抽血两毫升并维持该静脉通道。随机选择一侧下肢备皮,对该小腿后外侧中上1/3横截面最大处行超声造影检查;在检查部位腓骨侧皮下1cm处行穿刺活检。用橡胶圈5个同时捆绑于膝关节水平,5 H后解除捆扎的橡胶圈;于再灌注即刻、1H、2 H各时间点按上述方法依次行耳缘静脉采血、超声造影、组织病理穿刺检查;当复灌4 H时,静脉采血、造影后,处死实验对象,并立即在双侧小腿中上分后外侧分离各层组织结构。观察对比两侧肌组织解剖结构的改变,按Scully提出的“4C”标准(Colour、Capacity of blood、Contractibility、Consistency)判断骨骼肌损伤最重区域(比目鱼肌区)有无肌肉活力的丧失,分为有肌肉活力、无肌肉活力两组。最后取上述组织块行组织病理H-E染色,结果主要以肌细胞大小、肌间隙宽度、炎细胞的浸润程度为标准进行判读。所有血液样本经离心后测定血浆中CK、LDH含量。超声造影结果经脱机分析得到相关参数指标。结果:1.超声造影:(1)组间比较:无肌肉活力组,缺血再灌注即刻API明显小于有肌肉活力组(3.85±1.51d B对7.66±2.95d B),差异有统计学意义(P<0.05);之后各时间点API呈逐步降低,并均有前者小于后者趋势。但两组在始增时间(arrive time,AT)、达峰时间(time to peak,TTP)、峰值强度(peak intensity,PI)、升支斜率(ascending slope,AS)、降支斜率(descending slope,DS)、降支减半时间(half time of descending,HT)、曲线下面积(area under the curve,AUC)、50%清除率(washing-out50%slope)方面比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。(2)组内比较:(1)有肌肉活力组在缺血再灌注2 H时AT、TTP均明显长于造模前,分别为13.80±3.53s、21.97±4.26s对10.87±3.66s、16.61±3.60s,差异有统计学意义(均P<0.05),在再灌注2 H时AT较再灌注即刻也明显延长(13.80±3.53 s对10.53±3.77 s),差异有统计学意义(P=0.004)。该组内与造模前相比各时间点API均显著减小,差异有统计学意义(均P<0.05);缺血再灌注4H时与再灌注即刻相比,API明显降低(5.00±2.79 d B对7.66±2.95d B),差异有统计学意义(P=0.001)。与造模前比较,复灌4H时,PI也明显降低(10.74±4.25d B对14.98±5.22d B),差异有统计学意义(P=0.004)。(2)无肌肉活力组缺血再灌注即刻与造模前相比,AT明显延长(14.63±3.25s对12.46±2.43s),差异有统计学意义(P=0.002),再灌注4H时PI较造模前明显降低(9.76±3.78 d B对13.32±3.06 d B),差异有统计学意义(P=0.003)。2.血浆酶学检查结果:(1)CK在再灌注1H、2H、4H时在两组间比较,无肌肉活力组较有肌肉活力组明显升高(29172.13±10149.55 U/L对16857.10±5280.14 U/L、33450.50±9918.21对19502.70±7317.26 U/L、41212.75±12261.32对25169.10±7708.37 U/L),差异有统计学意义(均P<0.05);CK在无肌肉活力组再灌注的各时间点两两比较均有统计学意义(均P<0.05),且随时间延长,CK不断升高;(2)LDH在再灌注2H、4H时在两组间比较,无肌肉活力组也明显较有肌肉活力组升高(1366.45±654.96 U/L对642.09±193.80 U/L、1503.24±680.56 U/L对729.37±260.49 U/L),差异存在统计学意义(均P<0.05);LDH在两组内各时间点与造模前相比,无活力组从再灌注2 H开始明显升高(1366.45±654.96 U/L对110.55±21.45 U/L),差异有统计学意义(P=0.001),而有肌肉活力组从再灌注即刻就明显上升(463.49±160.48U/L对163.81±91.68 U/L),差异有统计学意义(P=0.001)。3.组织病理学:(1)再灌注4H,无肌肉活力组较有肌肉活力组肌原纤维间隙分离更明显,较多肌膜出现模糊不清,且中性粒细胞数目增多;(2)再灌注1H、2H组与造模前、再灌注即刻组相比,肌细胞稍肿胀,大小不一,肌间隙略增宽,肌原纤维溶解、断裂增多,部分肌细胞中出现多个圆形空泡;而再灌注4H组与再灌注1H、2H组相比,肌原纤维溶解、断裂更加突出,部分肌间隙开始出现中性粒细胞浸润;(3)但造模前组与再灌注即刻组相比,再灌注1H组与再灌注2H组相比没有观察到显著的区别。4.造影参数与酶学指标相关性分析:有肌肉活力组再灌注1 H时TTP与LDH、CK呈线性正相关,AS与LDH呈线性负相关,相关系数r为,0.66、0.74、-0.67,均P<0.05。无肌肉活力组造模前AUC、再灌注1H时AS、再灌注4H时AUC与CK均呈线性正相关,相关系数r为,0.92、0.78、0.80,均P<0.05。结论:超声造影参数API、PI、AT、TTP对评价早期骨骼肌缺血再灌注后肌肉活力有重要参考价值。