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目的研究PPAR-α/HO-1信号通路在肝细胞脂肪变性中的变化，探讨其在NAFLD发生发展中的可能作用及相关机制。方法体外培养人肝癌HepG2细胞株，以油酸（OA）诱导其脂肪变性，建立NAFLD细胞模型，采用不同浓度的PPAR-α激动剂非诺贝特（fenofibrate,FF）及抑制剂MK-886（10μmol/L）处理人肝癌HepG2细胞，将细胞分为6组：（1）对照组；（2）模型组：OA0.2mmol/L；（3）5μmol/L的FF模型组：OA0.2mmol/L+FF5μmol/L；（4）10μmol/L的FF模型组：OA0.2mmol/L+FF10μmol/L；（5）50μmol/L的FF模型组：OA0.2mmol/l+FF50μmol/L；（6）10μmol/L的MK-886模型组：OA0.2mmol/l+FF10μmol/L+MK-88610μmol/L。MTT法检测细胞相对活性并制作细胞生长曲线，油红O染色观察细胞内脂滴数量，甘油-3-磷酸氧化酶法检测细胞内甘油三酯（TG）含量,化学比色法测定细胞培养上清液中的丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性，实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测各组HepG2细胞PPAR-α、HO-1mRNA水平，免疫细胞化学法检测PPAR-α与HO-1蛋白表达。结果1、细胞生长曲线及油红O染色结果：细胞生长曲线结果显示，OA浓度≤0.2mM，HepG2细胞增殖活力不受影响，OA浓度>0.2mM，随OA浓度的增加HepG2细胞增殖活力逐渐下降。油红O染色结果显示，OA浓度对照组细胞边缘清晰，细胞内未见明显橘红色脂滴，诱导24h的HepG2细胞油红O染色见细胞内充满大小不等的橘红色脂肪滴，甚至融合，形成明显的细胞脂变特点。FF干预组与模型组相比，随FF浓度增高，细胞内脂滴逐渐变小，数量减少，PPAR-α抑制剂MK-886作用组细胞内有明显脂滴，呈现橘红色，与模型组无明显差异。2、细胞内TG检测结果：模型组与对照组相比，TG含量显著增高(P<0.01)；FF干预组与模型组相比，TG含量均明显降低(P<0.01)，且下降程度呈FF浓度依赖性，MK-886作用组TG含量与模型组相比无明显差异(P>0.05)。3、细胞培养上清液MDA及SOD检测结果显示：与对照组比较，模型组细胞培养上清液MDA含量明显升高(P<0.01)，SOD活性明显降低(P<0.01)。FF干预组与模型组相比，随FF浓度增加，细胞培养上清液MDA含量逐渐降低(P<0.01)，SOD活性逐渐升高(P<0.01)，且具有浓度依赖性，等摩尔浓度的MK-886明显阻断FF的激动作用，MDA含量及SOD活性与模型组相比无明显差异(P>0.05)。4、RT-PCR检测结果显示：正常HepG2细胞中PPAR-α及HO-1mRNA表达水平较高，而模型组PPAR-α和HO-1mRNA的表达明显下降(P<0.01)，同时，FF干预组与模型组相比，PPAR-α与HO-1mRNA的表达水平同步升高(P<0.01)，二者呈正相关（r=0.993），且均呈现FF浓度依赖性，MK-88610μmol/L可完全取消FF的作用，PPAR-α与HO-1mRNA的表达水平与模型组相比无明显差异(P>0.05)。5、免疫细胞化学染色结果显示：在正常HepG2细胞PPAR-α主要在细胞核表达，HO-1以胞浆表达为主，显色呈现明显的棕色颗粒沉积。图像分析及数据统计结果显示：与正常对照组相比，模型组PPAR-α蛋白与HO-1蛋白的表达量明显下降，与模型组相比，随着FF干预浓度增加,PPAR-α与HO-1蛋白的表达均升高（F值分别为139.201,126.733，P<0.01），二者呈正相关（r=0.997）,并呈现FF浓度依赖性，MK-886作用组PPAR-α与HO-1蛋白的表达与模型组相比无明显差异(P>0.05)。结论1.0.2mM油酸培养HepG2细胞24h成功建立NAFLD体外细胞模型；2.NAFLD的发生发展过程中氧化应激起着关键作用；3.PPAR-α对NAFLD的抑制作用很可能是通过HO-1途径，发挥HO-1的抗氧化应激作用，减轻肝细胞对二次打击的易感性实现的。