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目的：研究米诺环素、缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注后MMP-9和TIMP-1表达的影响,从而揭示米诺环素、缺血后处神经保护作用的可能机制,为临床治疗脑血管病提供实验依据。方法：雄性SD大鼠250只,体重250-320g,随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组、米诺环素组、联合治疗组,每组分6个时间点6h、24h、48h、3d、5d7d),假手术组为10只大鼠,其余各组每个时点均为10只大鼠。采用MACO法制备脑缺血再灌注模型,缺血再灌注组在缺血90 min后抽出线栓,恢复再灌注；缺血后处理组在缺血90 min后,将线栓拔出5 mm,30秒之后再将线栓放入30秒,反复3次后恢复正常血液灌注；米诺环素组再灌注后即给予腹腔注射米诺环素45mg/kg,以后每12小时一次；联合处理疗组同时给予上述两种方法干预。造模成功并经过评分入组后在相应时间点处死取材,比较各组大鼠神经功能评分、脑梗死体积、脑组织含水量、MMP-9和TIMP-1的动态表达及HE染色情况。结果：1、假手术组在各时间点均未发生神经功能障碍,其他各组神经功能评分在48h时最低,且显著低于假手术组(P<0.05)；缺血后处理组、米诺环素组于再灌注48h后神经功能评分显著优于缺血再灌注组(P<0.05)；于再灌注24h之后,联合用药组与米诺环素组或缺血后处理组之间比较差异有显著性(P<0.05)；而米诺环素组、缺血后处理组之间的比较无统计学差异。2、TTC染色观察脑梗死体积：假手术组无脑梗死发生；缺血再灌注后各时间点梗死均有出现,48h最为严重；各治疗组的梗死体积与缺血再灌注组比较,梗死体积明显减小(P<0.05)；联合处理组与米诺环素组或缺血后处理组相比梗死体积明显减小(P<0.05)；而米诺环素组与缺血后处理组之间比较无统计学差异。3、HE染色光镜下观察到假手术组未见神经元损伤和炎症反应,细胞形态正常完整：缺血再灌注组染色在缺血区变淡,缺血范围内皮质可见明显水肿、微血栓、炎症反应、神经元和胶质细胞数量明显减少,细胞呈空泡样变性,胞核固缩呈三角形,核仁消失。米诺环素组和缺血后处理组神经元损伤均明显轻于缺血再灌注组。联合处理组神经元损伤显著减轻。4、假手术组各时间点脑组织含水量基本一致,无脑水肿发生；缺血再灌注组脑含水量在大鼠脑缺血再灌注后逐渐增高,48h时达高峰,之后逐渐降低,与假手术组相比具有显著性差异(P<0.05)；缺血后处理组及米诺环素组与缺血再灌注组相比,24h以后脑含水量明显降低(P<0.05)；联合处理组在再灌注24h48h、3d、5d时脑组织含水量明显低于单独缺血后处理组或米诺环素组(P<0.05)；米诺环素组与缺血后处理组间比较无统计学差异。5、假手术组有较少量MMP-9表达；缺血再灌注组6h时即有MMP-9的表达,再灌注24h表达进一步增多；再灌注48h阳性细胞数达高峰；3d后表达开始下降,至7d时表达微弱；缺血后处理组、米诺环素组在6h、24h、48h、3d时MMP-9阳性细胞数均低于缺血再灌注组(P<0.05)；联合治疗组于24h、48h、3d、5d时MMP-9阳性细胞数表达低于单独应用缺血后处理或米诺环素组(P<0.05)。在再灌注3d时,米诺环素组抑制作用优于缺血后处理组(P<0.05)。6、假手术组有较少量TIMP-1表达；缺血再灌注6h时即可见到TIMP-1的表达,再灌注24h表达增多达高峰,48h后逐渐减少,7d时表达微弱；缺血后处理组、米诺环素组在再灌注6h、24h、48h、3d时TIMP-1阳性细胞数低于缺血再灌注组(P<0.05),至5天、7天时已无统计学意义(P<0.05)；联合处理组在6h、24h时表达明显低于缺血后处理组或米诺环素组(P<0.05)；在再灌注24h时,米诺环素组TIMP-1的表达比缺血后处理组减少(P<0.05)。结论1、线栓法是制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的理想方法。2、MMP-9与TIMP-1在脑缺血再灌注损伤过程中处于动态平衡状态,关系紧密。米诺环素及缺血后处理均可抑制MMP-9/TIMP-1的表达,联合应用作用更加明显。3、米诺环素及缺血后处理可以减轻脑水肿的形成、缩小脑梗死体积、改善神经功能障碍,两者联合使用具有更明显的效果。