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蛋白质的正确折叠构型是行使其生物功能的基础,也是生命正常运转的重要因素。我们利用脉冲升温技术快速引发蛋白质开折叠,使用时间红外光谱技术跟踪其动力学过程,成功的揭示了在重水环境下PYP蛋白热诱导的开折叠过程。此外,在生理条件下,盐离子会使蛋白质红外光谱复杂化,所以给研究其折叠过程带来了巨大的困难。我们使用二级结构组份分析方法避免了蛋白质盐效应对红外光谱的影响,成功的研究了缓冲体系中蛋白质的开折叠过程。
本论文利用变温稳态傅立叶红外(FTIR)光谱和脉冲升温时间分辨红外光谱研究光敏黄蛋白PYP在重水及缓冲溶液中的热稳定性,对不同条件下的PYP样品进行傅里叶变温稳态红外光谱和脉冲升温时间分辨瞬态红外光谱测量,并通过产T-jump动力学监测实验观测到在磷酸氘钾缓冲溶液条件下31℃时PYP的无规卷曲结构转化为β折叠结构的动力学过程,结合盐效应理论简历了动力学模型。证实了用脉冲升温时间分辨红外光谱研究蛋白质折叠过程是一种可靠手段。该结果对于进一步研究PYP的生物学功能将有积极意义。