光动力抗微生物化疗法对龈上病原菌群体灭活效果的研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:colinzeng76
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目的:光敏剂在光动力治疗过程中起着至关重要的作用。本实验旨在探讨国产抗肿瘤光敏剂血卟啉单甲醚(Hematoporphyrin Monomethyl ether,HMME)能否同样有效地介导光动力抗微生物化疗法(Photodynamic antimicrobialchemotherapy,PACT)杀伤龈上菌斑中的病原菌群体,并得出本实验条件下的最佳应用参数。  方法:筛选符合临床诊断标准的慢性成人牙周炎志愿者15名,使用无菌洁治器在感染的牙龈上缘收集龈上菌斑样本。采用454焦磷酸测序法对随机抽取的3个实验样本进行菌种鉴定和组成分析。将菌斑样本分别与相应浓度的HMME溶液均匀混合,获得终浓度为10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、40μg/ml的细菌悬浊液,选用波长为635 nm的红色激光对各浓度组的悬浊液分别照射5min、10min、15min、20min、25min。在适宜条件下培养经PACT治疗后的细菌悬浊液,利用菌落计数计算病原菌群体的存活率。通过各实验组间数据结果比较分析,评价治疗效果、得出最佳药物浓度和光照时间。  结果:在3个龈上菌斑样本中,共得到11489条高质量序列,涉及174个菌属的1520个细菌分类单位(Operational taxonomic units,OTUs)。3个样本共有160个相同的OUTs,占总数的10.5%。其中,厚壁菌门数量最多(占相同总数的55.7%),,ynergistetes门最少(占相同总数的0.6%)。HMME在联合应用激光时表现出良好的介导光动力灭菌的能力。随着药物浓度的增加、光照时间的延长,灭菌效果显著地增强。HMME浓度为40μg/ml、光照时间为25 min实验组的细菌存活率最低,仅为1.0%±1.0%,但是与浓度40μg/ml光照15min组(细菌存活率为1.4%±0.6%)、浓度40μg/ml光照20min组(细菌存活率为1.2%±0.4%)和浓度30μg/ml光照25min组(细菌存活率为2.8%±1.4%)相比,并没有明显的统计学差异(P>0.05),而且在本实验中HMME浓度和光照时间的乘积与细菌的存活率呈指数关系,指数因子为3.3(0.6)×102μg/ml·min。  结论:以上结果可初步表明,HMME介导的PACT能够有效杀灭龈上菌斑中的以兼性厌氧菌为主的病原菌群体,具有良好的治疗龈上菌斑相关疾病的潜力。使用40μg/ml HMME配合15min光照或30μg/ml HMME25min光照均可取得满意的治疗效果。
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