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[目的]根据机体肿瘤细胞与正常人淋巴细胞对尖脉冲的共振响应频率不同,合理选择不同尖脉冲参数使肿瘤细胞膜发生不可逆电穿孔致其死亡同时,尽可能避免损害正常人淋巴细胞。从而拟定最佳的尖脉冲数据方案并观察比较杀伤后肿瘤细胞及正常人淋巴细胞的形态、细胞周期、侵袭力,及尖脉冲杀伤体内移植瘤模型初步探索,为探讨其肿瘤杀伤现象的相关机理提供实验室数据,并为尖脉冲应用于临床肿瘤治疗奠定理论基础。[方法]选取本实验中心保存的云南个旧锡矿工肺鳞癌细胞株(YTMLC)及正常人淋巴细胞(LY)为实验对象,改变不同参数(频率、时间、电压)尖脉冲分别作用于YTMLC及LY,MTT法和荧光染色计数法共同测定YTMLC及LY杀伤率,获取最佳杀伤参数以最大程度杀伤YTMLC同时,尽量避免LY受到损害；建立模拟YTMLC和LY体外共同生长环境,选取最佳参数杀伤YTMLC,透射电镜观察分析YTMLC及周围LY超微结构变化,流式细胞仪分别检测YTMLC及周围LY细胞周期,构建侵袭小室,观察YTMLC侵袭力变化；建立小鼠体内YTMLC移植瘤模型,分别在肿瘤病灶或全身施加尖脉冲,评估小鼠生存状态及观察瘤体形态变化,病理学方法进一步确认杀伤后细胞组织结构改变。[结果]1、不同参数尖脉冲作用于YTMLC及LY,以MTT法及荧光染色计数法共同检测不同样本杀伤率,当频率120Hz、电压2lkV及作用时间80s时,YTMLC与LY杀伤率差值最大,即为该实验最佳杀伤参数；2、该最佳参数尖脉冲作用于模拟YTMLC和LY体外共同生长环境,透射电镜观察YTMLC不可逆性电穿孔效应明显,而周围LY未见明显不可逆性电穿孔现象；流式分析YTMLC呈现S期阻滞,细胞增殖明显抑制,G2/M期细胞消失,而LY细胞周期无明显变化。3、该最佳参数尖脉冲作用于YTMLC后,侵袭及转移能力显著降低；4、构建小鼠移植瘤模型,该最佳参数尖脉冲局部或全身作用,抑瘤效应明显(肿瘤体积缩小,癌巢坏死),小鼠生存状态无明显影响。[结论]当尖脉冲参数为频率120Hz、电压21kV及作用时间80s,能最大程度杀伤YTMLC同时,尽可能避免LY受到损害,具有较大临床意义。该参数尖脉冲体外作用于模拟YTMLC及LY体外共同生长环境,YTMLC不可逆性电穿孔效应明显,细胞增殖抑制,G2/M期细胞消失,且侵袭及转移能力显著降低,而LY未见明显不可逆性电穿孔效应,细胞增殖正常。该参数尖脉冲作用于小鼠移植瘤模型,抑瘤效应明显,且小鼠生存状态无明显影响。