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、目的利用微透析取样技术研究华中五味子对于奥氮平在大鼠脑内药动学的影响,考察体外具有P-gp抑制功能的五味子能否通过抑制脑内P-gp的外向转运功能从而增加奥氮平在脑内的浓度,以期提高药物的疗效,为精神分裂症的治疗提供新的思路和试验依据。二、方法1.奥氮平微透析探针体内外回收率的考察采用CMA微透析系统分别用增量法和减量法考察体外不同流速下探针对于奥氮平的回收率,增量法考察不同浓度下探针对其回收率的影响及探针对于奥氮平体外回收率的稳定性。选用清洁级健康成年雄性SD大鼠(250-300g),脑部手术固定微透析套管,大鼠手术恢复两天后用于奥氮平体内回收率的测定实验：采用CMA微透析系统考察不同流速不同浓度下探针对于奥氮平的体内回收率及探针对于奥氮平体内回收率的稳定性试验。2.给药及采样选用清洁级健康成年雄性SD大鼠18只(250-300g),按完全随机分组设计分为三组,每组6只。三组连续7天分别灌胃给予空白溶媒(空白对照组)、维拉帕米(25 mg/kg)(维拉帕米组)、华中五味子醇提取物30 mg/kg (五味子组),第8天各组均分别灌胃给予空白溶媒、维拉帕米(25 mg/kg)和华中五味子醇提取物30 mg/kg20min后灌胃给予奥氮平4 mg/kg,5min后用已平衡好的微透析系统采样,前6h每半小时收集一管样品,后14h每小时收集一管样品。样品收集完后转入-70℃冰箱保存待测。3.生物样品测定方法采用柱切换技术联合HPLC-MS/MS法测定大鼠脑微透析液中奥氮平的浓度。三、结果1.微透析样本中奥氮平浓度的测定采用柱切换技术联合HPLC-MS/MS法测定微透析样品中奥氮平的浓度。脑微透析样本中,奥氮平在0.085ng/mL～34ng/mL浓度范围内线性良好,日内日间精密度变异均<13.1%。样本无需复杂前处理过程,操作简便,方法灵敏度高,适用于小体积大批量样本的测定。2.探针对于奥氮平体内外回收率的影响随着流速的增加,奥氮平体内外回收率均呈降低趋势,且采用增量法及减量法测得的回收率在各种流速下均基本一致。在20-200ng/mL的浓度范围内,奥氮平回收率基本保持一致,不随浓度的改变而改变,体外回收率约为21.64%,体内回收率约低于体外回收率为16.23%。试验结果显示无论体内或体外奥氮平回收率在20h内保持相对稳定,由体内外稳定性试验可以得出,当灌流液流速在1.5μL/min时,奥氮平体外平均回收率为21.83%,体内平均回收率为16.59%。3.五味子对于大鼠脑内奥氮平药动学的影响大鼠脑中AUC0→20h(ng·h/mL):奥氮平对照组为294.14±52.78,维拉帕米组为1377.13±409.61,五味子组为289.62±81.60,五味子组和奥氮平对照组间无统计学差异,维拉帕米组AUC0→20h(ng·h/mL)增大了375.81%,与奥氮平对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。大鼠脑中Cmax (ng/mL):奥氮平对照组为93.91±35.91,维拉帕米组为217.01±83.13,五味子组为75.25±34.74,五味子组和奥氮平对照组间无统计学差异,维拉帕米组Cmax增大了131.41%,与奥氮平对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。四、结论1.临床剂量下华中五味子不能增加奥氮平在大鼠脑内的药物浓度,对奥氮平在大鼠脑内的药动学几乎无影响。2.P-gp的经典抑制剂维拉帕米与奥氮平合用,能显著增加大鼠脑内奥氮平的浓度,增加奥氮平脑内曲线下面积,这一试验结果提示可以通过寻求其他有效安全的新型P-gp抑制剂,与抗精神分裂症药物合用,增强脑内抗精神分裂症药物的浓度,以期提高药物疗效,为抗精神分裂症的治疗提供新的思路和依据。