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[研究背景]侵袭性真菌感染(IFI)在恶性血液病患者中的发病率逐年升高,是主要的并发症和死亡原因之一。由于IFI早期诊断困难、治疗费用高昂、死亡率高,因此针对高危人群进行预防治疗正越来越受到人们的重视。伊曲康唑由于抗菌谱广、不良反应较轻,价格相对便宜,适合作为预防用药。[研究目的]1.伊曲康唑对急性髓系白血病患者IFI的预防作用。2伊曲康唑预防治疗的安全性。3伊曲康唑血药浓度与预防效果、不良反应的关系。[研究方法]1.对移植中心符合入组条件的急性髓系白血病患者根据诱导疗程和巩固疗程的不同,分别进行随机分组。2.口服液组予伊曲康唑口服液2.5mg/kg bid(7am, 7pm)。序贯组予伊曲康唑200mg ivdrip q12h×2d,之后予口服液2.5mg/kg bid维持。3.根据不同时间点抽取静脉血标本,检测伊曲康唑血药浓度。4.观察IFI发生情况和药物不良反应。5.两组之间率的比较采用四格表法x2检验。两组之间均数的比较采用t检验。P≤0.05认为差别有统计学意义。[研究结果]1.入组患者112例,共310例次。其中诱导疗程105例次,巩固疗程205例次口服液组156例次,序贯组154例次。收集血药浓度标本917份。2.序贯组与口服液组侵袭性真菌感染的发生率分别为10.1%和20.9%(P=0.0095)。两组患者因不良反应而停药的比例均较低(4.5%和5.7%),无明显差异。3.序贯组和口服液组稳态血药浓度分别为(698±399)ng/ml和573±363)ng//ml(P<0.01)。预防成功患者伊曲康唑稳态血药浓度为(576±302)ng/ml,IFI突破组为(463±358)ng/ml(P<0.01),[结论]1.伊曲康唑在急性髓系白血病患者粒缺期预防侵袭性真菌感染是安全有效的。2.静脉+口服液序贯方案的预防效果优于单纯口服液方案,不良反应没有明显增加。3.伊曲康唑预防效果与血药浓度密切相关,因此预防治疗时有必要进行药物浓度监测,及时调整药物剂量,以期获得较好的预防效果。[目的]建立一种用于移植后嵌合体定量分析的方法一基于SNP基因分型的实时荧光定量PCR定量技术,初步探讨该技术在检测移植后植入状态中的应用。[方法]筛选了分别来自于5条不同染色体的7个特异性SNP位点,合成相应的引物和探针；抽取10例无关健康人模拟供受者,利用Taqman探针建立实时荧光定量PCR法,对模拟嵌合体进行检测,用以评价本方案的可行性和准确性。最后分别对6例异基因造血干细胞移植后患者进行嵌合体分析。[结果]1.SNP位点选择：从dbSNP数据库中筛选了7个SNP位点,这7个SNP位点包括三种碱基替换类型,其中3个C/T,3个A/G,1个T/G。在中国人群中基因频率介于0.3～0.8之间,且分布于不同染色体上。2.基于SNP分型的定量方法的建立：我们制作了各SNP位点的标准曲线。以rs4245位点C等位基因为例,阴、阳性模板经实时PCR扩增后,操作软件输出标准曲线y=-3.467x+27.722,扩增效率为0.94,R2=0.998。说明：该标准曲线线性关系好,灵敏度不低于0.01%。3.临床标本分析：3例复发患者中受者细胞比例分别为16.23%,55.86%和89.41%。其中第1例患者FISH检测BCR/ABL基因比例为7.2%,3例未复发患者受者细胞比例均小于5%说明SNP-PCR方法在预测移植后复发方面的价值。[结论]实时荧光定量SNP-PCR检测方法整体操作简便,经济省时,且具有更灵敏、更准确的优点,是异基因造血干细胞移植后嵌合体检测的更为有效的方法。