论文部分内容阅读
背景：我国慢性肾脏病（CKD）患病率高，导致沉重的社会负担。肾间质纤维化（RIF）是各种CKD和同种异体肾移植损伤的主要特征，这一病理过程涉及细胞外基质（ECM）在肾间质广泛沉积，肾小管上皮细胞发生上皮-间质转化（EMT），成纤维细胞增殖、活化，和炎症细胞浸润的共同作用。血管内皮因子（VEGF）和血管生成素-1（Ang-1）与ECM广泛沉积关系密切，在CKD和RIF中起关键作用。我们在单侧输尿管梗阻（UUO）诱导的RIF模型中，检测VEGF和Ang-1的表达情况，探讨其与RIF发病的关系与可能的分子机制。
方法：20只雄性6周龄SpragueDawley（SD）大鼠随机分为2组（假手术组，UUO组）。本实验通过苏木精-伊红（HE）染色、Masson染色和RIF指数评估2周末和4周末2组大鼠肾脏组织病理变化情况；应用免疫组化和蛋白质印迹法检测肾组织中VEGF和Ang-1的蛋白表达；通过免疫组化检测肾组织Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）、纤连蛋白（FN）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达。
结果：（1）HE和Masson染色显示：假手术组肾小管及肾间质无明显改变，胶原纤维沉积少；UUO组肾小管管腔扩张变形，间质增宽伴炎性细胞浸润，肾小管上皮细胞萎缩，胶原纤维沉积在肾间质，RIF指数增高（P<0.01），随着时间推移，上述趋势逐渐增强。（2）免疫组化和蛋白质印迹法显示UUO组VEGF的蛋白表达较同时间点假手术组大鼠显著升高，随着时间推移，表达量升高。（3）免疫组化和蛋白质印迹法显示UUO组Ang-1的蛋白表达较同时间点假手术组大鼠显著减少，随着时间推移，表达量降低。（4）免疫组化显示UUO组Col-Ⅳ、FN和TGF-β1蛋白表达均显著增加（P<均0.01），随着时间推移，表达量升高。（5）相关性分析：UUO组VEGF的蛋白表达与RIF指数及Col-Ⅳ、FN、TGF-β1的蛋白表达均呈正相关（r=0.749，0.722，0.766，0.693，P均<0.01）；Ang-1的蛋白表达与RIF指数及Col-Ⅳ、FN、TGF-β1的蛋白表达均呈负相关（r=-0.758，-0.741，-0.725，-0.680，P均<0.01）；VEGF的蛋白表达与Ang-1的蛋白表达呈负相关（r=-0.773，P<0.01）。
结论：UUO所致RIF大鼠肾脏组织VEGF的蛋白表达显著增加，Ang-1的表达显著减少；梗阻时间越长，VEGF表达越高，Ang-1表达越低，RIF程度越重。VEGF和Ang-1表达存在负相关关系，二者共同参与了RIF的发生发展。其机制可能与调控TGF-β1表达，介导ECM的积聚有关。
方法：20只雄性6周龄SpragueDawley（SD）大鼠随机分为2组（假手术组，UUO组）。本实验通过苏木精-伊红（HE）染色、Masson染色和RIF指数评估2周末和4周末2组大鼠肾脏组织病理变化情况；应用免疫组化和蛋白质印迹法检测肾组织中VEGF和Ang-1的蛋白表达；通过免疫组化检测肾组织Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）、纤连蛋白（FN）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达。
结果：（1）HE和Masson染色显示：假手术组肾小管及肾间质无明显改变，胶原纤维沉积少；UUO组肾小管管腔扩张变形，间质增宽伴炎性细胞浸润，肾小管上皮细胞萎缩，胶原纤维沉积在肾间质，RIF指数增高（P<0.01），随着时间推移，上述趋势逐渐增强。（2）免疫组化和蛋白质印迹法显示UUO组VEGF的蛋白表达较同时间点假手术组大鼠显著升高，随着时间推移，表达量升高。（3）免疫组化和蛋白质印迹法显示UUO组Ang-1的蛋白表达较同时间点假手术组大鼠显著减少，随着时间推移，表达量降低。（4）免疫组化显示UUO组Col-Ⅳ、FN和TGF-β1蛋白表达均显著增加（P<均0.01），随着时间推移，表达量升高。（5）相关性分析：UUO组VEGF的蛋白表达与RIF指数及Col-Ⅳ、FN、TGF-β1的蛋白表达均呈正相关（r=0.749，0.722，0.766，0.693，P均<0.01）；Ang-1的蛋白表达与RIF指数及Col-Ⅳ、FN、TGF-β1的蛋白表达均呈负相关（r=-0.758，-0.741，-0.725，-0.680，P均<0.01）；VEGF的蛋白表达与Ang-1的蛋白表达呈负相关（r=-0.773，P<0.01）。
结论：UUO所致RIF大鼠肾脏组织VEGF的蛋白表达显著增加，Ang-1的表达显著减少；梗阻时间越长，VEGF表达越高，Ang-1表达越低，RIF程度越重。VEGF和Ang-1表达存在负相关关系，二者共同参与了RIF的发生发展。其机制可能与调控TGF-β1表达，介导ECM的积聚有关。