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橄榄(Canarium album Raeusch)属橄榄科(Burseraceae)橄榄属(Canarium L.),是我国南方特产水果之一,已有2000多年的栽培历史。橄榄原产于中国,主要分布于广东、福建、台湾、四川、浙江、广西和海南等省。目前对橄榄的研究主要集中在栽培、生理、药用成分分析等方面,在分子生物学方面的研究较少。本研究以福建省60份橄榄遗传资源为材料,摸索出适合橄榄叶片基因组DNA的提取方法;建立并优化了橄榄ISSR反应体系;筛选出17条条带清晰,多态性好的ISSR引物;采用ISSR标记,结合聚类分析,进行了福建省橄榄遗传资源的亲缘关系与遗传多样性研究。为橄榄新品种的培育提供遗传背景,为橄榄种质资源的有效保护和合理利用提供科学依据。主要研究结果如下:1.橄榄富含酚类化合物和多糖等物质,易导致DNA提取和纯化困难。针对此问题,本研究采用改良CTAB法提取橄榄基因组DNA,数量和纯度均可满足ISSR分析要求,探索出一套操作简便、快速的橄榄DNA提取和纯化技术。2.建立了橄榄ISSR-PCR反应的技术体系。在20μL的反应体系中,采用40 ng的模板DNA,0.2 mmol/L dNTPs,0.25μmol/L ISSR引物,1 U Taq DNA聚合酶为橄榄1SSR-PCR扩增条件的最佳选择。按照此体系,在94℃预变性5 min,94℃变性30 s,最适退火温度退火60 s,72℃延伸90 s,40个循环,72℃延伸10 min。该体系扩增出的产物条带清晰易辨,效果良好,能够满足ISSR分析的要求。3.从96条ISSR随机引物中筛选出17条,对60个橄榄品种进行了ISSR-PCR扩增。共得到151条带,其中多态性条带有102条,多态性百分率为67.6%。同时研究中发现含(TC)n、(CA)n序列的ISSR引物在对橄榄DNA扩增时多态性水平较高,说明橄榄因组中富含(AG)n/(GT)n序列。4.对供试的橄榄品种进行聚类,分析结果表明:60份橄榄品种之间的遗传相似系数在0.819～0.991之间,揭示了不同橄榄品种之间的亲缘关系与遗传相似性。为以后有选择、有目的地引种、育种,缩短育种年限,提高育种效率奠定理论基础。5.分析的到橄榄种群的遗传分化系数为GST=0.2529,说明橄榄的遗传分化主要存在于种群内,种群间的分化较小。根据遗传分化系数估算的基因流的值是Nm=1.4773,大于1,表明种群间存在一定的基因交流。