猴头菇多糖对小鼠脾淋巴细胞及RAW264.7细胞体外免疫活性研究

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目的:1.研究猴头菇多糖(Hericium erinaceus polysaccharides,HEP)对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、细胞周期、细胞因子(Th1型、Th2型、NO)的分泌以及(Th1 型、Th2 型、T-bet、GATA-3、iNOS)mRNA 表达的影响;2.研究 HEP 对RAW264.7巨噬细胞增殖、细胞周期的分布、细胞凋亡的分布、细胞因子(NO、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10)的分泌、(iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10)mRNA表达以及NF-κB核蛋白表达的影响。方法:1.MTT法检测脾淋巴细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,ELISA法检测上清液中Th1型、Th2型细胞因子的分泌,Griess法检测NO分泌,RT-PCR法检测(Th1 型、Th2 型、T-bet、GATA-3、iNOS)mRNA 表达;2.MTT 法检测RAW264.7巨噬细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡,ELISA法检测上清液中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 的分泌;Griess 法检测 NO 分泌;RT-PCR法检测 iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA 的表达。结果:1.与对照组比较,HEP可显著促进小鼠脾淋巴细胞及T、B淋巴细胞增殖(P<0.05);HEP可促进小鼠脾淋巴细胞及T、B淋巴细胞从G0/G1期进入S期;与对照组比较,HEP可显著促进小鼠脾淋巴细胞及T淋巴细胞中Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ、TNF-α)、Th2 型细胞因子(IL-4、IL-6)、NO 分泌(P<0.05);与对照比较,HEP可显著促进小鼠脾淋巴细胞及T淋巴细胞中Th1型细胞因子(IL-2、IFN-y、TNF-α)、Th2 型细胞因子(IL-4、IL-6)、T-bet、GATA-3、iNOS mRNA表达。2.HEP可显著促进RAW264.7巨噬细胞增殖(P<0.05),促进RAW264.7巨噬细胞从G0/G1期进入S期,抑制巨噬细胞凋亡,促进巨噬细胞分泌 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、NO,促进 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、iNOS mRNA表达及促进NF-κB蛋白表达。结论:1.HEP能通过促进脾淋巴细胞DNA的合成从而促进淋巴细胞的增殖,可通过促进细胞因子基因的表达从而促进细胞因子的分泌,提高脾淋巴细胞的免疫活性;2.HEP通过活化NF-κB通路,促进细胞因子的表达与分泌,提高RAW264.7巨噬细胞免疫活性。
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