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猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2，PCV2)是引起猪断奶后多系统衰竭综合征等相关疾病的重要病原。本研究参照GenBank中已发表的PCV2全基因组序列，设计合成两对引物，利用PCR方法扩增分离毒株PCV2-GD、PCV2-HLJ1、PCV2-HLJ2的全基因组，将PCR产物纯化后克隆到pMD18-T载体中，PCR鉴定阳性后进行序列测定，应用DNAStar分析软件与GenBank中已发表的其他毒株序列进行核苷酸及其氨基酸相似性比较，结果表明PCV2-GD株、PCV2-HLJ1株、PCV2-HLJ2株均为1767bp，与世界各地的PCV2全序列核苷酸相似性在93.8％-99.7％之间，各PCV2毒株之间差异不大。而3个PCV2分离株之间全序列核苷酸相似性为97.5％-98.9％，与欧、美部分毒株亲缘关系较近。
本研究自行设计了引物和探针，制备了PCV2阳性样品，成功建立了PCV2实时荧光定量PCR．检测方法，该方法具有较高的特异性，而其灵敏性为1x102copies/μL。自建的PCV2实时荧光定量PCR检测方法具有实际的应用价值，这为后续研究PCV2对猪和BALB/c小鼠致病机理奠定了基础。自制PCV2灭活疫苗免疫新西兰大白兔，免疫4次后采血分离血清，利用高效液相色谱仪纯化提取了兔抗PCV2 IgG，为间接免疫荧光测定病毒TCIDso与免疫组化试验的顺利进行奠定了基础。
本研究通过不同途径、不同剂量与不同攻毒次数将PCV2-HLJ1株接种6周龄BALB/c小鼠，利用间接ELISA对攻毒后不同时间剖杀小鼠所采集分离的血清进行检测，结果显示PCV2抗体阳性，感染小鼠未出现明显临床症状。病理组织学观察可见脑神经细胞皱缩，肾脏淤血，肾小管变性，肺脏淤血，淋巴细胞浸润，脾脏轻微水肿等病理变化。免疫组化结果显示，在肝脏、脾脏、肺脏存在PCV2病毒抗原。通过荧光定量PCR可检测到部分组织存在病毒核酸。感染的BALB/c小鼠组织病料能分离到PCV2，测序比较PCV2 ORF2核苷酸序列相似性为99.1％，氨基酸序列相似性为98.3％。以上结果表明PCV2能感染BALB/c小鼠，并能造成小鼠产生一定的病理变化，诱导体液免疫应答。
本研究建立了检测BALB/c小鼠凋亡相关基因表达的SYBR．Green I荧光定量PCR方法，探讨了猪圆环病毒2型感染BALB/c小鼠后凋亡相关基因的表达调控机制，通过对凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2、Bak mRNA的表达水平进行统计分析，结果表明实验组Caspase-3的表达在各时间段里相对于对照组均呈上升趋势，提示了猪圆环病毒2型感染可以上调Caspase-3水平，从而增加受病毒感染组织的细胞凋亡。其中小鼠心、脑、脾等组织的Bak基因表达明显上调，Bc1-2基因表达水平也伴随Bak基因而升高。通过PCV2、PCV2联合KLH/ICFA(钥孔戚血蓝蛋白)方式、PCV2联合PRRSV方式分别感染4周龄健康仔猪(杜长大三元杂)以比较其致病性的差异。试验动物随机分为5组，空白对照组(n=5头)，PCV2单独感染组(n=5头)，PCV2和PRRSV共感染组(n=5头)，PCV2联合KLH/ICFA组(n=5头)，PRRSV单独感染组(n=5头)；通过临床症状、肉眼与病理变化、病毒抗原分布、病毒对血液中氧自由基SOD活性的影响、MDA含量变化的影响及病毒排毒规律等几个方面研究PCV2的侵袭机理。研究结果表明PCV2组、PCV2+KLH/ICFA组、PCV2+PRRSV组中，PCV2抗体水平没有明显的差异，血清转阳出现在第7天，持续到第14天，但在第21天未见有血清转阳，随后第28天出现有血清转阳，表明PCV2感染在猪体内有可能是无规律的复制，当机体抗体水平升高时，PCV2复制程度有可能降低。PCV2+KLH/ICFA组、PCV2+PRRSV组能复制出猪断奶多系统衰竭综合征的临床表现，表明免疫刺激剂KLH/ICFA与PRRSV对加重PCV2感染有明显的促进作用。通过PCV2+PRRSV组与PRRSV组中的PRRSV抗体水平的比较，可见PCV2+PRRSV组中PRRSV抗体水平略低于PRRSV单独感染组，这表明PCV2感染对PRRSV体液免疫应答有一定抑制作用。感染猪血清中SOD活性是呈下降的趋势，MDA含量是呈上升的趋势。猪感染PCV2后，出现了生长迟缓的现象。猪感染PCV2后仅有个别猪出现发烧，而PRRSV与PCV2混合感染则可以使大多数猪出现发烧。猪感染PCV2可以通过呼吸道和消化道进行排毒，而且病毒一直持续存在，表现为无规律排毒。利用PCR方法对PCV2感染猪的内脏组织中存在的PCV2病毒进行检测，结果发现PCV2病毒存在于病猪的心脏、淋巴结、肾脏、肺脏、肝脏和脾脏中。而PCV2、PCV2+PRRSV感染猪的组织病理学变化主要可见肺泡壁增厚充血，肺泡壁上皮细胞脱落，肺泡充血，肺部细支气管上皮脱落，周围淋巴细胞增多，肺支气管淋巴细胞增多，脾脏淋巴细胞缺失，肾小管上皮细胞崩解、出血，肾小管结构模糊。这对PCV2临床诊断和致病机理研究具有一定指导意义。