发展一种新的LAMP技术快速检测石斑鱼虹彩病毒(SGIV)

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本文针对石斑鱼虹彩病毒(SGIV)建立了一种新的坏介导的等温核酸扩增检测技术。针对开放读码框014L设计了包括环引物在内的6条特异性引物组,同时构建了SGIV ORF-014L核酸序列的重组质粒pT-014L作为检测阳性模板。结果显示,在聚合酶Bst DNApolymerase largefragment作用下,反应温度65℃、反应时间60mins为最佳LAMP扩增条件,通过条带分子量大小和限制性内切酶Mst Ⅰ对产物进行进一步鉴定;另外,4引物组和6引物组对阳性模板的最早检出时间相差一倍,分别是40min和20min。
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