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天然和重组蛋白类、多肽类药物在治疗疑难病症中发挥越来越重要的作用，但其稳定性差、半衰期短、免疫原性强的弱点使药效大打折扣。聚乙二醇修饰法增强了蛋白的抗酶解稳定性，显著延长血液半衰期，降低了免疫原性，但是在慢性治疗中由于大分子量聚乙二醇（PEG）在体内积累，部分病人会产生针对聚乙二醇的抗体。本文以可生物降解的聚唾液酸（PSA）连接双官能团聚乙二醇修饰剂，嵌段聚合修饰尿酸酶，降低其抗原性，并望在慢性治疗中发挥重大作用。采用阴离子交换层析对粗提取的聚唾液酸进行纯化，收集目标峰测定聚唾液酸和蛋白含量，聚唾液酸回收率为79.7%，蛋白含量由1.99×10-3mg蛋白／mg PSA降低为为9.16×10-4mg蛋白／mg PSA，对样品超滤脱盐、冷冻干燥得产品。对纯化的聚唾液酸进行两步活化，先用高碘酸钠将非还原端相邻的醇羟基氧化产生活性醛基，再加入胱胺盐酸盐和二硫苏糖醇形成活性巯基，通过2,4-二硝基苯肼法检测醛基活化程度100%，埃尔曼法检测巯基活化程度38.6%±2.68%。活化的聚唾液酸和异基双功能聚乙二醇在25℃反应半小时，形成嵌段聚合物，然后于4℃下修饰尿酸酶。利用凝胶层析（TOSOH Toyopearl HW-55F）对修饰后尿酸酶进行纯化。收集相应峰进行化学法鉴定，第一流出峰检测到含量最高的聚唾液酸、聚乙二醇和蛋白，表明嵌段聚合修饰成功。通过SDS-PAGE电泳对分子量变化进行鉴定，目标峰显示45和55kDa的模糊条带。经多角度激光光散射凝胶系统测定聚唾液酸分子量为34.2kDa，尿酸酶分子量为140kDa，缀合物分子量为521.4kDa，而PEG分子量为3.5kDa。通过计算得每个四聚体连接10.08个修饰剂，则平均每个尿酸酶单体连接2.52个嵌段聚合物修饰剂。相对原始酶，修饰酶酶活保留率72.4%，体外热失活半衰期由115.5h提高到231h，交联比为12.3，氨基修饰率为10.6%，对高温、酸碱、胰蛋白酶的耐受稳定性显著提高。采用其他方法修饰尿酸酶：一种为还原胺基化修饰尿酸酶，即聚唾液酸非还原端的醇羟基氧化为醛基后，在还原剂的作用下，与尿酸酶25℃下反应48h，形成缀合物；第二为聚乙二醇修饰尿酸酶，聚乙二醇于4℃与尿酸酶反应2h，形成修饰物。采用凝胶层析对修饰物进行纯化，以化学法和SDS-PAGE进行鉴定。比较三种修饰方法，聚乙二醇修饰具有最高的修饰率，摩尔比为18.10，氨基修饰率14.1%，嵌段聚合修饰次之，聚唾液酸修饰程度最低；嵌段聚合修饰酶活保留率最高为72.4%，聚乙二醇修饰最低为53.6%；聚乙二醇修饰半衰期最长为402h，嵌段聚合修饰和聚唾液酸修饰半衰期接近。三种修饰方法较未修饰尿酸酶抗原性显著降低，嵌段聚合修饰和还原胺基化修饰抗原性接近，聚乙二醇修饰较高。