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糖尿病是一种以高血糖为特征的慢性疾病,严重时可引起多种并发症,对人体健康造成了严重的威胁。目前市面上有多种治疗糖尿病的口服药物,但均会产生各种不良反应。因此,寻找天然的食源性降血糖活性成分对糖尿病的预防和干预具有重要意义。海参是一种滋补佳品,其多种活性成分已被证明具有降血糖活性,但是,海参蛋白作为海参中的主要成分,对来源其中的海参活性肽的相关研究却较少。因此,本论文首先通过对比不同品种海参的基本营养成分及各酶解物的体外降血糖活性,筛选出最佳的海参品种用于制备海参降血糖肽,并优化酶解制备工艺。随后探究最佳产物的体内降血糖活性及作用机制,并进一步探究其修复糖尿病引起的肝肾损伤的作用。本论文的主要研究内容和结果如下:(1)首先对比了不同品种海参的基本营养成分以及酶解产物的二肽基肽酶-IV抑制活性,从而筛选出最佳的海参品种用于制备海参降血糖肽,然后进一步优化了其酶解工艺并鉴定了酶解物中潜在的DPP-IV抑制肽。结果显示:来自地中海地区的野生米刺参具有较高的蛋白含量,且其酶解物的DPP-IV抑制活性较强,故选择米刺参进行降血糖肽的制备;进一步确定制备工艺为:采用木瓜蛋白酶与复合蛋白酶1:1复配酶解,总加酶量为干海参质量的1%,在55℃、p H 7的条件下酶解4 h,此工艺制备的米刺参酶解物的DPP-IV抑制活性最强,在终浓度为2 mg/m L时的DPP-IV抑制率为66.97%,蛋白回收率为76.25%,水解度为6.10%;米刺参酶解产物中90%以上为分子量小于5000 Da的肽类物质,通过液质联用技术并结合DPP-IV抑制肽的结构特点,筛选出28条N端第二位置为Pro的潜在DPP-IV抑制肽,如APGPAGPA、GPAGLTG等,且均未被报道。(2)采用高脂饲料结合链脲佐菌素建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型,以评价米刺参酶解产物的体内降血糖活性及其脂质代谢调节能力,并进一步探究了其降血糖作用机制。结果显示:八周后,模型组大鼠血糖值达到18.00 mmol/L,而采用200 mg/kg米刺参酶解物干预的降血糖效果显著(p<0.05),大鼠血糖值降至16.00 mmol/L;采用400 mg/kg米刺参酶解物干预的降血糖效果极显著(p<0.01),大鼠血糖值降至13.60 mmol/L,并显示更强的维持体重的能力,具有剂量效应关系。同时,高剂量的米刺参酶解物还能显著(p<0.05)改善葡萄糖耐量并降低糖化血红蛋白水平;显著降低血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平;通过分析大鼠体内胰岛素水平,发现高剂量米刺参酶解物能够极显著(p<0.01)降低HOMA-IR水平并增强ISI水平,且Westen Bloting结果显示高剂量米刺参酶解物能增加肝脏组织Akt、GSK-3β的磷酸化水平与GLUT4蛋白的表达,表明米刺参酶解物可通过调节PI3K-Akt信号通路改善肝脏的胰岛素抵抗作用从而调节血糖。(3)通过测定血清生化指标、肝脏抗氧化水平及肾脏的炎症水平,结合HE切片结果,评价了米刺参酶解物对II型糖尿病大鼠肝脏和肾脏的保护作用。结果显示:米刺参酶解物在400 mg/kg高剂量下可极显著(p<0.01)降低糖尿病大鼠血清Urea、AST水平,减少肝肾组织的损伤,并且能通过显著(p<0.05)增强肝脏组织GSH-Px的活性,从而极显著(p<0.01)减少MDA在肝脏的积累,减轻肝脏的氧化应激作用,降低脂质过氧化程度,缓解肝脏的损伤;此外,米刺参酶解物还可极显著(p<0.01)减少肾脏组织TNF-α、TGF-β1与IL-1β的含量,故具有减轻肾脏的炎症反应、修复肾脏功能损伤、缓解糖尿病肾病发生的作用。因此,米刺参酶解物不仅具有调节II性糖尿病患者血糖和血脂水平的能力,还能减轻糖尿病引起的肝肾损伤,可以作为预防和缓解糖尿病及其并发症的潜在食源性活性成分。