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三聚氰胺(Melamine，MEL)分子中含有大量的氮元素(67％)，非法添加至食品中可以提高蛋白质检测数值。罗格列酮(Rosiglitazonemaleate，RSG)属噻唑烷二酮类抗糖尿病药物，由于功效明显副作用小，常被违规添加至降糖类保健食品中。目前上述两种对象的主要检测方法为精确、稳定的仪器法，但该方法存在成本高、通量低、前处理繁琐等不足。免疫分析法能弥补以上缺点，作为高通量筛选手段，被广泛应用于食品安全检测中。针对目前国内外现有三聚氰胺免疫检测产品灵敏度不足及尚无罗格列酮免疫检测产品，本论文主要开展了以下研究工作：
1.分别建立基于多克隆抗体的三聚氰胺间接竞争ELISA(icELISA)和直接竞争ELISA(dcELISA)，优化反应时间等检测条件，得到dcELISA检测限为12.13ng/mL，线性范围为29.72～668.30ng/mL；icELISA的检测限为8.33ng/mL，线性范围为22.60～687.38ng/mL;选择灵敏度较高的icELISA模式进行方法评价，检测方法中三聚氰胺回收率在80％～120％之间，日内及日间检测水平差异(CV)<15％；实验试剂4℃下可保存4个月左右。
2.分别建立基于多克隆抗体的罗格列酮间接竞争ELISA(icELISA)和直接竞争ELISA(dcELISA)，优化反应时间等检测条件，得到dcELISA检测限为0.69ng/mL，线性范围为2.33～153.25ng/mL；icELISA检测限为0.18ng/mL，线性范围为0.68～63.01ng/mL；选择灵敏度较高的icELISA模式进行方法评价，检测方法中罗格列酮添加回收率在84％～106％之间，日内及日间检测差异(Cv)<16％；实验试剂4℃保存4个月左右检测水平不受影响。
3.研究不同甲醇含量磷酸盐缓冲溶液对奶粉中三聚氰胺提取效果的影响，结果显示50％甲醇缓冲盐溶液不仅可以充分提取样品中三聚氰胺，而且具有沉淀蛋白质的作用。乳制品样品前处理简单易行，液态奶及奶粉提取液经高速离心，稀释适当倍数可进行检测，样品检测时间小于90min。
4.考察不同有机溶剂对保健品中罗格列酮提取效果的影响，确定以无水乙醇作为样品提取液，结合超声提取方式，20min可完成样品中罗格列酮的提取：复溶液选取40％甲醇-磷酸盐缓冲液，经适当稀释可进行检测。罗格列酮高效液相检测法样品前处理方式与ELISA检测方法一致，样品回收率为82％～94％，变异系数在3％～10％之间。
本论文为食品中及保健品非法添加物三聚氰胺及罗格列酮快速检测试剂盒的开发奠定了基础，并为三聚氰胺及罗格列酮样品前处理提供依据。