论文部分内容阅读
目的:传统的抗肿瘤药物治疗目标选择性不高,往往给人体带来了很多伤害和不良反应。为了避免这些不良反应的发生,使药物能够到达靶部位后定点释放,本课题主要在介孔硅纳米材料表面吸附进纳米金颗粒,连接叶酸后,以盐酸阿霉素为药物模型,通过物理原理,将药物载入介孔中,制备出具有热疗、化疗、靶向为一体的纳米药物。方法:首先一步合成法直接合成连接氨基的介孔硅纳米材料,将介孔硅纳米颗粒用稀释后的醋酸处理后,氨基质子化,使氢键之间的相互作用减弱,使介孔硅呈纳米颗粒单分散状态,同时提高对金纳米颗粒的静电吸附作用。然后利用EDC和NHS活化叶酸的羧基,叶酸的羧基和介孔硅表面氨基发生酰基化反应,将叶酸连接在介孔硅表面,利用紫外分光光度计测量叶酸的含量。通过物理原理载负阿霉素进入合成的MSN@Au-FA的介孔内部后,利用荧光分光光度计(FL)分别测量药物的载药率和包封率。在37℃,PH=7.4的PBS溶液中,模拟人体内环境,考察药物在体外环境的释放情况;对合成的纳米材料进行溶血试验,考察纳米材料与血液生物安全性;将MSN@Au-FA/DOX纳米颗粒对小鼠黑色素瘤细胞(B16)、人肝癌细胞(Hep-G2)、人卵巢癌细胞(Hela)三种细胞株进行体外细胞实验,考察自制的纳米材料的毒性作用,细胞摄取情况和比较材料的热疗效果,观察实验结果。结果:合成的MSN粒径可控、分散性良好、大小均一,粒径92.3±31.7nm,Zeta电位+36.59mv,静电吸附金纳米颗粒。通过透射电子显微镜观察,Au纳米颗粒均匀的吸附在介孔硅纳米颗粒表面,分散性良好。MSN@Au-FA纳米粒通过物理作用,测不同比例的材料与阿霉素的载药实验,当材料:阿霉素=1:1时,载药率最大为46.48%,包封率为92.95%。从溶血实验结果可以看出,自制的纳米材料符合生物医学材料的生物安全性,与血不互溶。从B16、Hela和Hep-G2三种细胞的MTT实验结果看出,MSN、MSN@Au、MSN@Au-FA纳米材料细胞存活率较高,三种纳米材料对细胞没有毒性。观察MSN@Au、MSN@Au-FA纳米材料对Hela细胞的细胞抑制率实验,NIR照射3min,结果表明细胞存活率50%以下,说明材料具备热疗的作用,实验结果具有统计学意义。结论:叶酸修饰的载药纳米粒在体外细胞实验的结果可以看出,叶酸修饰的载药纳米粒与肿瘤细胞结合率高;载有金颗粒的纳米粒具有明显的热疗作用。