犬尿氨酸酶对人宫颈腺癌顺铂耐药细胞生物学特性的影响

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目的:探讨犬尿氨酸酶(Kynureninase,KYNU)对Hela/DDP细胞生物学特性的影响。  方法:1、培养Hela及Hela/DDP细胞,通过qPCR和Western Blot方法检测KYNU在Hela和Hela/DDP细胞株中分别在mRNA和蛋白水平的表达。2、构建KYNU过表达质粒,增强KYNU在低表达细胞中的表达量。3、应用Transwell方法、流式细胞术分别检测KYNU过表达后对耐药细胞迁移、侵袭能力及细胞凋亡率的影响。  结果:1、通过qPCR及Western Blot方法检测发现KYNU在Hela细胞中mRNA及蛋白水平的表达均高于 Hela/DDP细胞。2、应用 Transwell方法检测HeLa/DDP细胞、Hela/DDP-空载细胞、Hela/DDP-KYNU细胞的迁移能力,24小时穿过的胞数分别为125±6、123±5和68±5,Hela/DDP-KYNU组细胞迁移数较Hela/DDP-空载组少(P﹤0.05)。3、Transwell方法检测3种细胞侵袭能力,HeLa/DDP组、HeLa/DDP-空载组、HeLa/DDP-KYNU组24小时穿过的细胞数分别为69±9、67±5、65±4,KYNU蛋白不影响HeLa/DDP细胞侵袭能力(P>0.05)。4、Hela/DDP组、Hela/DDP-空载组、HeLa/DDP-KYNU细胞凋亡率分别是3.2%±0.09%、4.0%±1.9%、32.4%±3.3%。Hela/DDP-KYNU组细胞凋亡率较Hela/DDP-空载组高(P﹤0.05)。  结论:1、KYNU在Hela/DDP细胞mRNA和蛋白水平低表达,提示KYNU的低表达可能和HeLa细胞顺铂耐药有关。2、KYNU能抑制Hela/DDP细胞体外迁移能力并增强其凋亡。3、KYNU表达上调有助于降低Hela/DDP细胞迁移能力,并促进细胞凋亡,有望成为顺铂耐药宫颈腺癌治疗的有效靶点。
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