【摘 要】
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目的:拉米夫定是抗病毒核苷类药物,对乙型肝炎病毒(HBV)有明显的抑制作用,但拉米夫定易复发和血清转换率低。因此拉米夫定治疗乙型肝炎的最大问题是长期治疗后产生病毒变异而
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目的:拉米夫定是抗病毒核苷类药物,对乙型肝炎病毒(HBV)有明显的抑制作用,但拉米夫定易复发和血清转换率低。因此拉米夫定治疗乙型肝炎的最大问题是长期治疗后产生病毒变异而耐药和停药后HBV DNA的反跳。本研究探讨拉米夫定治疗后乙型肝炎病毒耐药位点出现的变化规律,分析其发生机制,对进一步治疗方案的确定、分析YMDD变异对治疗效果的影响具有重要临床价值。方法:选择应用拉米夫定治疗的患者14例,常规离心后收集外周血清,定量PCR扩增,纯化后通过双脱氧测序的方法获得HBV DNA序列,最后通过计算机Mclone软件进行分析,动态观测不同耐药时段HBV DNA变异位点发生规律。结果:应用拉米夫定的患者随着使用时间的延长,HBV DNA水平逐渐转阳,经过测序发现大部分的患者都出现YMDD变异,其中有11例为YVDD变异,而3例出现YIDD变异。随着用药时间的进一步延长,部分患者出现ALT反弹,进行第2次测序中发现,在原有YMDD变异基础之上,又出现许多新的变异位点,主要发生位点有:A181V T184S,A181T S202I,A181T S202I,A181T V214,T184S V214A,A181V T184S,T184S S202I,A181V Q215S,A181V T184S,V214A,A181T,A181S V214A,S202T S239C C304S等变异株的发生,变异位点集中于181位点与214位点之间。结论:拉米夫定耐药株以YMDD基序(214位点)为基础,进行第一次言窈蠼⑵鹞榷ǖ哪鸵┎《靖粗浦?在经过第二次选择,以氨基酸181位点和214位点为中心(B,C和D区),建立具有致病能力的病毒株,上述位点可能与拉米夫定作用HBV DNA聚合酶的位置有关。随着治疗时间的延长,患者存在不同程度的生物化学突破,表现为不同程度的ALT的升高。
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