论文部分内容阅读
近年来,间充质干细胞（MSCs）广泛应用于组织工程和再生医学领域。既往认为,MSCs是通过分化为功能细胞替代局部受损细胞的方式发挥对受体的治疗作用。但随着对其生物学性能了解的深入,人们发现MSCs具有免疫抑制性能,能分泌多种免疫调控因子,介导巨噬细胞转变为抗炎性反应表型,从而改善损伤组织局部免疫微环境,促进组织再生修复。脂肪来源间充质干细胞（ASCs）具有体内储量大,易获取,增殖能力强等优势,在组织工程领域中的应用逐渐展现出巨大潜力。因此,本论文尝试用两种不同的手段对ASCs免疫抑制性能进行调控并对其作用机制进行探讨,以期为ASCs在组织修复领域的深入研究及临床应用提供了一个新的思路与理论依据。生物材料表面不仅可以为细胞提供迁移和生长的结构支撑,还可以提供特定的理化刺激调控细胞表型,进而改善局部组织微环境。纤维取向作为纤维基生物材料的关键材料学因素之一,对细胞具有重要的调控作用。因此,本论文首先研究了静电纺丝纤维取向对ASCs免疫抑制性能的影响及其分子机制。结果表明,相比于具有随机取向的纤维,具有相同取向的纤维能促进ASCs表达多种免疫调控因子（如PGE2、TSG-6等）,并进而诱导dTHP-1细胞向抗炎性反应表型（M2型）巨噬细胞极化。进一步研究揭示FAK-ERK1/2和YAP/TAZ信号通路参与介导具有相同取向的纤维对ASCs免疫抑制性能的调控。miRNA-146a是首个被发现在免疫系统中具有调节作用的微小RNA（mi RNA）,其在先天性及适应性免疫细胞的分化及功能中发挥着至关重要的调控作用。mi RNA海绵是一种能“吸附”特定miRNA家族的miRNA反义序列,可有效下调靶mi RNA的含量。因此,本论文针对miR-146a设计并构建了特异性miRNA海绵,将其转入ASCs中下调miR-146a的表达。我们发现,miR-146a的下调能促进ASCs表达多种免疫调控因子（如TSG-6、IDO等）和趋化因子（如MCP-1）,并进而促进dTHP-1细胞的迁移及诱导其向抗炎性反应表型（M2型）巨噬细胞极化。另外,miR-146a的下调还能刺激ASCs表达与成骨相关的基因（如ALP、Runx2等）,诱导ASCs合成碱性磷酸酶及沉积钙结节,使其向成骨方向分化。