天麻素对慢性应激诱导的小鼠焦虑和抑郁样行为的作用及其机制研究

• 作 者: 刘海艳
• 机 构: 陕西中医药大学
• 出 处: 陕西中医药大学
• 发表日期: 2018年期
• 关键词: 天麻 天麻素 抗焦虑作用 抗抑郁作用

目的：考察天麻中天麻素对慢性应激诱导小鼠焦虑行为和抑郁行为的作用，并结合神经药理学、行为学以及分子生物学等手段探讨其抗焦虑和抗抑郁的作用机制。　　方法：采用重复束缚应激（Repeated Restraint Stress，RRS）建立小鼠焦虑模型，腹腔注射天麻素（Gastrodia，200mg/kg）和丁螺环酮（2.5mg/kg）后，通过体重测试、旷场实验以及高架十字迷宫实验评价天麻中天麻素对RRS模型小鼠的抗焦虑作用，同时通过ELISA检测RRS小鼠炎性因子IL-6和TNF-α在杏仁核区表达的影响；采用westernblot法检测小鼠杏仁核区NF-κB、PPARγ以及Iba-1蛋白表达水平变化；采用免疫荧光检测小鼠杏仁核区小胶质细胞的表达（Iba-1标记）。　　采用慢性不可预知性温和应激（Chronic Unpredictable Mild Stress，CUMS）制备小鼠抑郁症模型，腹腔注射天麻素（Gastrodia，200mg/kg）和丙咪嗪（20mg/kg）后，通过小鼠体重测试、旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验评价天麻中天麻素对CUMS模型小鼠的抗抑郁作用，同时通过ELISA检测检测天麻中天麻素对CUMS模型小鼠血清TNF-α、IL-1β和海马区炎性因子TNF-α、IL-6、IL-17、IL-1β以及BDNF表达的影响；采用western blot法检测小鼠海马区NF-κB、PPARγ、GFAP以及Iba-1蛋白表达水平变化；采用免疫荧光检测小鼠海马区星形胶质细胞（GFAP标记）和小胶质细胞的表达（Iba-1标记）。　　结果：在天麻素的抗焦虑作用研究中发现，与正常组比较，7天RRS后，小鼠表现出明显的焦虑样行为，表现为体重变化减少，旷场实验中小鼠中央活动时间减少，高架十字迷宫实验中小鼠的开臂进入次数、开臂滞留时间减少，但对其运动能力没有影响；与模型组比较，天麻素组小鼠的焦虑样行为明显改善，表现为小鼠中央活动时间、开臂进入次数、开臂滞留时间都显著增加，进一步检测显示，天麻素组小鼠杏仁核中的TNF-α和IL-6有所降低，杏仁核区NF-κB蛋白水平有所降低和PPARγ蛋白水平有所升高，western blot和免疫荧光显示小鼠杏仁核区小胶质细胞特异性标记物Iba-1表达有所降低。丁螺环酮与天麻素具有相似的作用。　　在天麻素的抗抑郁作用研究中发现，与正常组比较，42天CUMS后，模型小鼠表现出明显的抑郁样行为，表现为体重变化减少，小鼠悬尾实验和强迫游泳实验中的不动时间增加，但其运动活性没有显著改变；与模型组比较，天麻素组小鼠的抑郁样行为有所改善，表现为体重变化有上升的趋势，小鼠悬尾实验和强迫游泳实验中小鼠的不动时间有所下降，进一步检测显示，天麻素组小鼠血清中TNF-α、IL-1β和海马组织炎性因子TNF-α、IL-6、IL-17、IL-1β的含量明显降低，BDNF的含量显著升高。海马组织中的NF-κB蛋白水平有所降低和PPARγ蛋白水平有所升高，western blot和免疫荧光显示小鼠海马区星形胶质细胞（GFAP标记）和小胶质细胞的表达（Iba-1标记）显著降低。　　结论：天麻中天麻素能够改善慢性应激诱导的小鼠焦虑和抑郁样行为，其作用机制可能与天麻素抑制了慢性应激诱导的神经炎性反应有关。