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背景：结肠癌是最常见的成人恶性肿瘤之一，在中国其发病率和死亡率有上升趋势。目前结肠癌的治疗方法是以手术为主，辅以化疗、分子靶向药物、免疫治疗以及其它支持治疗的综合治疗。近来结肠癌的免疫治疗引起了人们的重视。外泌体(exosome，EXO)是由细胞的多囊泡体与细胞膜融合后释放到细胞外环境中的小囊泡，作为一种非细胞肿瘤疫苗，其在动物肿瘤模型中显示出了免疫保护作用。但单用EXO达不到人们所期望的抗肿瘤效果。因此，有必要寻找一种合适的佐剂来增强EXO的抗肿瘤作用。合成的包含有未甲基化的CpG二核苷酸的寡聚脱氧核苷酸(CpGOligodeoxynucleotides，CpG ODN)是一种强效免疫刺激剂，它能够激活机体的免疫系统诱导产生强烈的免疫应答。在一些动物模型中也显示出了抗肿瘤作用。以CpG ODN作为免疫佐剂，与肿瘤细胞分泌的EXO(tumor-derived exosome，Texo)联合应用于结肠癌的治疗研究国内外尚未见报道。
目的：观察小鼠结肠癌细胞CT-26分泌的Texo联合CpG ODN1826免疫小鼠的T细胞体外对CT-26细胞的杀伤作用，以及对CT-26细胞移植瘤的治疗作用。
方法：使用差速离心法分离和提取CT-26细胞分泌的Texo，紫外分光光度计进行蛋白定量，透射电镜观察Texo的形态。用Texo、CpG ODN1826、CpGODN1826+Texo(联合组)和生理盐水(对照组)免疫BALB/c小鼠，四甲基偶氮唑蓝(MAT)法测定T细胞对CT-26细胞的体外杀伤活性。建立CT-26小鼠结肠癌皮下移植瘤模型，1周后皮下注射Texo、CpGODN1826、CpG ODN1826+Texo以及生理盐水，观察它们对皮下移植瘤生长的抑制作用。
结果：CT-26细胞分泌的Texo为直径30～100nm的圆形或椭圆形膜囊泡，有完整的包膜。与对照组相比，单独使用Texo或CpG ODN1826免疫小鼠，均能增强小鼠脾脏T细胞的杀伤活性(P<0.05)，而Texo和CpG ODN1826联合免疫的小鼠脾脏T细胞的杀伤活性更强，且与对照组、Texo或CpGODN1826免疫小鼠组相比明显增强(P<0.05)。动物实验表明，单独使用Texo、CpG ODN1826或二者联合使用，都能显著抑制CT-26细胞在体内生长(P<0.05)。但Texo组和CpG ODN1826二组之间对肿瘤的生长抑制无明显差异(P=0.064)。而联合组与Texo组和CpG ODN1826组相比，对肿瘤的生长抑制更明显，P值分别为P=0.047和P=0.001。
结论：与CpG ODN和Texo单药相比，二者联合用药能更有效的抑制小鼠结肠癌皮下移植瘤的生长。Texo与CpG ODN1826联合的免疫治疗可与化疗等其他治疗方法联合应用于临床结肠癌患者的治疗。