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鱿鱼分布于全世界,包含许多有重要经济价值的品种,它们常被加工成各种风味食品来销售。近年来,该类产品的捕捞和消费逐渐上升。而由于不同鱼种的营养价值和滋味成分有很大不同,其价格差异巨大,因其引发的鱼类产品安全性问题也逐渐成为关注焦点。虽然很多国家都有相应的法规,要求产品外包装上必须注明产品的学名、产地等信息,但是标签制度的实施及掺假造假的判定标准都必须建立在.准确、快速的种类鉴定的基础上。然而,至今仍然没有针对鱿鱼,特别是鱿鱼深加工产品的快速种类鉴定方法。本文以柔鱼科鱿鱼为研究对象,阴性对照选择与目标品种亲缘关系相近的头足类品种(如真蛸和虎斑乌贼等),采用DNA条形码技术、荧光定量PCR技术和环介导等温扩增技术(LAMP)对其进行品种分析和鉴定。主要研究结果如下:1.利用通用引物,成功扩增茎柔鱼、柔鱼、阿根廷滑柔鱼和太平洋褶柔鱼的线粒体COI基因片段,获得长约658 bp的DNA条形码。结合BOLD和GenBank数据库中17种柔鱼科品种的条形码,进行多重序列比对,发现序列变异主要集中在碱基第三位点,且序列突变未饱和,故适用于系统发育分析。将完整条形码拆分为9块区域,初步探讨了利用DNA微型条形码区分常见柔鱼科鱿鱼品种。基于K2P模型的统计分析显示,所有条形码的平均种间遗传距离是种内遗传距离的18-41倍,其中完整条形码、微型条形码-204-2和102-2中存在明显的条形码间隙;在聚类分析中,这三个条形码构建的邻接树都能形成置信度较高的单系群。因此DNA条形码技术能高效鉴定鱿鱼品种,且微型条形码技术可用于深加工鱿鱼商品的种类鉴定。2.使用其他线粒体基因,建立了针对柔鱼科的荧光定量PCR探针检测体系和分别针对四种常见鱿鱼品种的种类特异性检测体系。通过分析GenBank数据库中的线粒体基因,选择线粒体Cytb基因用于检测柔鱼、COI基因用于检测茎柔鱼和太平洋褶柔鱼、ATPase 6基因用于检测阿根廷滑柔鱼,并根据12S rDNA基因设计了针对柔鱼科的特异性引物和探针。研究表明:1)四个种类特异性探针体系能够区分国内市场里四种最常见的鱿鱼品种;2)针对柔鱼科品种设计的Probe-12S rDNA体系能有效区分柔鱼科鱿鱼与其它头足类品种;3)根据标准曲线的斜率算得所建立检测体系的扩增效率为95.8-102.6%;4)在混合DNA样品中,目标DNA也能高效扩增而不受非目标DNA的干扰。因此加工样品里的鱿鱼成分也能被检出,能满足相关鱿鱼类品种的检测需要。3.选择线粒体COI基因设计针对茎柔鱼的LAMP种类特异性引物,分别开发了基于LAMP扩增的实时荧光检测法和指示剂检测法。研究表明:针对茎柔鱼设计的引物具有较强的特异性,在反应温度为65℃时,两种检测方法都能有效区分茎柔鱼与其它相似头足类品种;两种LAMP检测方法的绝对检出限能达到10 pg/反应,相对检出限能达到0.01%;这两种方法也能用于头足类加工产品的检测,适用于鱿鱼类商品的现场、快速种类鉴定。