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目的:研究miR-152和DNMTs家族成员在胃癌中的作用以及交联对话的机制,为临床评估胃癌的预后及寻找治疗靶点提供实验依据。方法:首先用原位杂交的方法检测miR-152在80对胃癌组织及其相应的癌旁正常组织中的表达情况,并采用qRT-PCR检测胃癌组织及不同分化程度的胃癌细胞株的miR-152的表达水平。接着通过体外转染miR-152 mimic至胃癌上皮细胞株MKN-45和HGC-27,观察miR-152表达变化对细胞增殖能力、侵袭能力以及细胞非锚定依赖性生长能力的影响。通过免疫组化和qRT-PCR的方法检测DNMTs在胃癌组织和细胞中的表达,以及DNMT1蛋白表达和miR-152表达之间的相关性。通过生物学信息软件、荧光素酶报告基因预测和鉴定miR-152的靶基因。通过共同转染miR-152和3’UTR突变型DNMT1至胃癌上皮细胞株MKN-45和HGC-27,检测细胞中DNMT1蛋白的表达及观察细胞增殖能力、侵袭能力和细胞非锚定依赖性生长能力的变化。结果:原位杂交和qRT-PCR结果显示,相较于癌旁正常组织,有80%(64/80)胃癌患者的胃癌组织中miR-152表达呈低表达状态,且和胃癌的浸润深度和TNM分期明显相关。相对于早期胃癌,miR-152的表达水平在进展期胃癌组织中明显减少,胃癌分化程度越低,其miR-152表达水平降低越明显。人胃癌上皮细胞株miR-152表达水平较正常胃粘膜上皮细胞显著降低,低分化或未分化胃癌上皮细胞株中miR-152表达水平显著低于中分化和高分化胃癌细胞株。转染miR-152 mimic至胃癌上皮细胞株实现miR-152高表达,能明显抑制胃癌细胞的增殖率、侵袭能力以及细胞非锚定依赖性生长能力。免疫组化和qRT-PCR结果显示,DNMTs家族中DNMT1的阳性表达率显著高于DNMT3a和DNMT3b,而且DNMT1的阳性表达与胃癌的侵润深度、淋巴结转移以及TNM分期明显相关,而DNMT3a和DNMT3b均未发现类似结果。胃癌上皮细胞株中DNMT1表达水平比正常胃粘膜上皮细胞显著升高,而DNMT3a和DNMT3b的表达则为降低。而且DNMT1表达水平与胃癌细胞分化程度有关,细胞分化程度越低,其DNMT1表达水平升高越显著。Pearson’s相关检验方法分析显示,在胃癌组织和胃癌细胞株中,miR-152表达水平与DNMT1蛋白表达水平呈负相关性。通过生物学信息软件、荧光素酶报告基因检测证实DNMT1是miR-152的靶基因。进一步共同转染 DNMT1-wtUTR(或 DNMT1-mtUTR)和 miR-152mimic,发现转染后的胃癌细胞中,miR-152能够通过DNMT1的3’UTR调控DNMT1转录后的表达。同时发现DNMT1 3’UTR的突变可逆转miR-152高表达对细胞增殖能力、侵袭能力和肿瘤细胞的非锚定依赖性生长能力的抑制作用。结论:miR-152能够抑制胃癌的增殖、生长及侵袭等细胞生物行为。胃癌细胞中,miR-152的表达缺失导致其靶基因DNMT1在转录后的表达量增加,从而影响相关抑癌基因的异常甲基化,进而促进了胃癌的发生与发展,最终影响胃癌的预后。