鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白和耐药基因的研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chengwenjie123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究以鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestiler,RA)七个七种不同血清型代表菌株及具有血清学交叉反应的四个菌株为材料,采用超速离心法提取外膜蛋白(OMP)进行SDS-PAGE分析,结果表明SCAU1主要OMP大小为11kDa、19kDa;SCAU2主要OMP大小为6kDa、19 kDa、58kDa;SCAU3主要OMP大小为18kDa、54kDa;SCAU5主要OMP大小为14kDa、18 kDa、22kDa;SCAU6主要OMP大小为22kDa、27 kDa、63kDa;SCAU7主要OMP大小为19 kDa、20kDa、75kDa;SCAU8主要OMP大小15kDa、19 kDa、32kDa。菌株8(SCAUl xSCAU3)与SCAU1、SCAU3相同的0MP为18kDa、71kDa大小的OMP,菌株9(SCAU2 xSCAU3)与SCAU2、SCAU3相近的OMP为56kDa、58kDa、61kDa大小的OMP,菌株10(SCAU5 x SCAU6)与SCAU5、SCAU6相同的OMP为27kDa大小的OMP;菌株11(SCAU5 x SCAU7)与SCAU5、SCAU7相同的OMP为17kDa、21kDa大小的OMP。RA不同血清型菌株主要相同或相近OMP集中在17kDa、25kDa、70kDa大小左右,提示可以这三类OMP建立RA的鉴别诊断方法,也可建立基于OMP的RA基因分型的方法。通过Western-Blot对不同血清型RA免疫原性分析表明,其主要阳性反应OMP集中在17kDa、25kDa、70kDa大小左右这三类蛋白。为下一步进行RA亚单位疫苗的研究、基于外膜蛋白的RA基因分型及RA抗体水平的监测打下基础。 自2005年至2007年从广东、福建、广西、江西、江苏等省份送检的病鸭、死鸭及鸭病料进行RA的分离鉴定,从13次临床症状疑似RA感染的病例共73份病料中,分离出疑似RA菌株128株,通过麦康凯平板接种,氧化酶、糖醇发酵等生化试验,分离鉴定出50株RA。根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI,2006)推荐的Kirby-Bauer(K-B)琼脂法进行β-内酰胺类(青霉素G、头孢氨苄)、磺胺类(复方新诺明)、四环素类(四环素、多西环素)、氯霉素类(氯霉素、氟苯尼考)、氨基糖苷类(链霉素、庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星、壮观霉素)、利福霉素类(利福平)、氟喹诺酮类(环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星)等七类共16种抗生素进行药物敏感试验,总体情况为耐药占53.30%,中介占15.1096,敏感占31.50%,耐药情况相当严重。耐药率由高到低依次为:复方新诺明(SXT)81.40%、四环素(TE)81.40%、青霉素G(P)74.42%、诺氟沙星(NOR)69.77%、环丙沙星(CIP)65.12%、利福平(RA)62.79%、氧氟沙星(OFL)60.47%、壮观霉素(SPT)55.81%、氯霉素(C)53.49%、卡那霉素(K)53.49%、链霉素(S)41.86%、庆大霉素(GM)39.53%、头孢氨苄(CX)32.56%、多西环素(D0)32.56%、氟苯尼考27.91%、阿米卡星(AN)20.93%。RA治疗临床用药推荐为阿米卡星、氟苯尼考、庆大霉素、链霉素,敏感率依次为72.09%、58.14%、51.16%、46.51%。对氟苯尼考耐药菌株FloR,氟喹诺酮类耐药菌株的GyrA、ParC、Qnr,利福平耐药菌株的rpoB等耐药基因进行PCR扩增。12株氟苯尼考耐药RA中FloR基因阳性4株,PCR产物大小约为1200bp,与NCBI上发表的大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌等FloR基因序列相似性为82.3%~99%。32株氟喹诺酮类抗生素耐药RA中Onr阳性1株,PCR产物大小约为300bp,与NCBI上发表的肺炎克伯氏杆菌、大肠杆菌、阴沟肠杆菌等Qnr基因的相似性为95%~98%。未能扩增GyrA、ParC基因。27株利福平耐药的RA中rpoB耐药基因阳性1株,PCR产物大小约为390bp,与NCBI上发表其他种属菌株rpoB基因相似性为78%~87%。
其他文献
期刊
摘要:现代科技的发展和社会的进步给教育战线提出了一个培养"创新型"人才的新课题。为了适应教育改革与发展的新形势,构建面向21世纪小学数学教学的新体系,我们对大量小学数学课堂教学进行了深入地分析研究,发现大部分课堂教学还没有跳出传统的教学模式,不适应"创新型"人才的培养和全面落实素质教育。主要存在着这样一些问题:老师讲解多,学生思考少;一问一答多,研讨交流少;操练记忆多a,鼓励创新少;强求一致多,发
摘要:以多媒体计算机和网络技术为核心的信息技术在作文教学中的广泛应用,正在引发作文教学的深刻变革。本文试从个人的教学经历,谈谈如何利用网络资源促进农村小学作文教学。  关键词:网络资源 小学作文教学  随着校园网的建成及多媒体进入课堂,信息技术与学科的整合已经逐渐成为教学现代化的一种优化模式。作为一名农村小学语文教师,如何将社会信息化的进程与语文课程的变革和发展有机结合起来,充分利用多媒体网络资源
交际能力是语言能力的核心。听、说、读、写是语言能力的四个分项技能,也叫大技能。大技能则由微技能组成。由于语言的学习过程始于模仿,这一现象就使得“听”这一大技能走在
为了解广东省大量饲养鸡主要品种白细胞介素-18(Chicken Interleukin-18,ChIL-18)全基因序列,该研究应用RT-PCR技术,参照国外己发表的ChIL-18基因序列,自行设计1对引物,以PHA
摘要:政治是初中教育科目中的重要构成内容,能够帮助学生形成正确的人生观、价值观以及世界观。有效的课堂教学应该摒弃过去传统式的“灌”而变为“导”,“导”出学生的学习技巧,“导”出学生看问题、解决问题的能力的提高。当下,校园内兴起了新一轮探讨教师如何应该掌握和运用的有效教学策略,来实现思想政治课有效教学的热朝。  关键词:初中政治 有效教学 策略  进行课堂教学改革,实施有效教学,已成为我们思想政治课
摘要:文章从反思在教学过程中的意义出发,是教师专业发展和自我成长的核心因素。要通过教学前反思明确教学目标,制定教学方案;教学中反思关注学生情感把握教学进程,优化师生行为;教学后反思明确教学得失,重视课堂效果。  关键词:新课标 教学反思 教学方案 自主学习  美国著名学者波斯纳(Posner)提出教师成长的公式:成长=经验+反思。新课程教学呼唤教师从单纯的知识传递者走向研究者、反思者,也就要求新时
摘要:随着新一轮英语教学改革的深入,《英语课程标准》对学生的词汇量提出了更高的要求,学生在词汇方面面临着巨大的压力。面对浩如烟海的英语词汇,我们的学生常常感到身心疲惫,而效果并不明显。在英语教学中,教师花了大量的时间在词汇学习上,但效果并不理想。很多的学生就因为词汇这一关就永远被关在了大学的门外,因为没有一定量的词汇,提高英语就只能是一句空话,所以作为英语教师帮助学生闯过词汇关是势在必行。那么怎样
练习是国际汉语教材的重要组成部分。国内所编写的对外汉语教材练习在语言结构和功能的设置编排上有优势,而海外学者所编写的练习则在把握海外汉语学习者需求上有更为准确、
国际汉语教师的培养模式随汉语国际推广的性质、目标和任务的变化而变化。本文从国际汉语教师职业的强实践性这一基本事实出发,分析了知识型和应用型国际汉语教师培养模式中