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经过近十多年来的研究,胃泌素/胃泌素受体系统显示了令人瞩目新的生物学作用,除了参与中枢神经系统、胃肠道、胰腺及脑—肠轴的正常生理功能外,在甲状腺癌、小细胞性肺癌、胃肠道肿瘤、胰腺癌等肿瘤组织中表现了异常增多胃泌素受体的表达,并显示了可能在肿瘤发生,发展,分化,转移过程中起重要作用。肝癌在中国人群中属于多发病,常见病,死亡率高。以外科为主的综合治疗在近几十年的发展中,效果仍不满意,因此对肝癌多途径,多位点,不同分子水平的干预,发展新的治疗方法,作为肝癌综合治疗有益的补充,是急待解决的问题。近年来胃泌素的研究主要集中在胃肠道、胰腺,在肝脏中研究较少,其结果仍有争议。有人认为人肝癌组织中极少表达或不表达胃泌素受体,但有结果却显示胃泌素受体在肝癌中具有有意义的表达。而胃泌素是否在肝癌的发生、发展中起作用,相关胃泌素受体是否存在是需要明确的关键性问题。本研究希望能为胃泌素受体在肝癌中(细胞株、人组织标本)是否表达,提供一些证据,并进一步探讨胃泌素与胃泌素受体相互作用对肝癌细胞株生长的影响,以及肝癌组织中胃泌素受体的表达情况与临床病理资料的关系。
在第一部分研究中,我们采用免疫细胞化学技术检测了四种人肝癌细胞株胃泌素受体表达情况,结果显示在较高一抗浓度下,三种人肝癌细胞株可见胃泌素受体阳性表达,表达强弱为SMMC—7721>HepG2>QGY—7701,而在Bel-7402中未见明显表达。
在第二部分中,我们采用MTT比色分析法研究在不同浓度胃泌素和胃泌素受体拮抗剂丙谷胺的干预下,四种人肝癌细胞株的生长增殖情况,结果显示胃泌素在接近生理浓度下促进QGY—7701和Bel-7402的增殖,丙谷胺对胃泌素的作用有抑制作用。过量的胃泌素对QGY—7701有抑制效果。胃泌素对HepG2和SMMC—7721无明显促增殖作用。丙谷胺在高浓度下对所有细胞株皆有明显的抑制作用。同时,为进一步验证胃泌素对肝癌细胞株生长促进作用的机制,我们采用流式细胞术分析细胞周期的变化,结果显示:胃泌素可促使Bel-7402 G0/G1期细胞向S、G2/M期转化,加用丙谷胺后胃泌素的上述作用消失。
第三部分,我们采用免疫组织化学的方法研究人肝癌组织标本中胃泌素受体表达情况,收集临床病理资料,将胃泌素受体表达强弱与临床资料中肿瘤的病理
指标做相关性分析。结果显示:胃泌素受体的阳性表达率为56%(14/25)。但胃泌素受体的表达与患者性别、年龄、临床分期、有否乙肝后肝硬化、肿瘤大小均无明显相关性。有脉管癌栓组与无脉管癌栓组显示出胃泌素受体表达差异有统计学意义。