人参皂甙生物合成候选基因的克隆

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人参(PanaxginsengC.A.Meyer)是中国特产的具有世界影响的传统名贵中药,人参皂甙(ginsenoside)为其主要药用有效成分.因人参皂甙不能化学全合成且在人参中含量极低,目前还不能实现低成本商业化生产人参皂甙的目的.人参的生物学特性表明,人参根组织中人参皂甙的百分含量具有生长发育的时间特异性,即一年生人参中人参皂甙的百分含量极低,长至四年时百分含量急剧增加.推论,人参皂甙含量的时间性差异很可能是人参皂甙生物合成相关基因(合成酶基因和/或转录因子基因)呈时间性差异表达调控的结果.因此,该实验选择一年生人参和四年生人参为研究对象,采用抑制消减杂交技术构建四年生人参根组织的消减cDNA文库.通过文库筛选,测序分析,与GenBank中的数据库进行同源性比较和反向Northern斑点杂交鉴定,确认六个cDNA序列为人参皂甙生物合成候选新基因序列.这六个cDNA序列已在GenBank中登录,登录号分别为AF485332、AF485333、AF485334、AF485335、AF485336、AF485337.
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