【摘 要】
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第一部分体外培养小鼠微量圆形精子细胞冷冻保存方法研究目的：探讨体外培养微量小鼠圆形精子细胞的最佳冷冻方法和冷冻条件。方法：采用玻璃化冷冻和常规慢冷冻分别在不同浓度甘
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第一部分体外培养小鼠微量圆形精子细胞冷冻保存方法研究目的：探讨体外培养微量小鼠圆形精子细胞的最佳冷冻方法和冷冻条件。方法：采用玻璃化冷冻和常规慢冷冻分别在不同浓度甘油（5%、7%、11%）及不同平衡时间（0、15、30、45、60min）条件下对体外培养所获微量小鼠圆形精子细胞进行冷冻保存。结果：（1）玻璃化冷冻和常规慢冷冻在7%甘油中平衡时间30min均可获得最佳复苏率；（2）在最佳冷冻条件下，玻璃化冷冻小鼠圆形精子细胞的复苏率显著高于常规慢冷冻方法（P＜0.05）。结论：采用玻璃化冷冻方法，在7%浓度的甘油保护剂中平衡30min行微量小鼠圆形精子细胞冷冻，可获得较满意的细胞复苏率。第二部分冻融体外培养小鼠圆形精子细胞在体外受精中的应用价值目的：探讨冻融体外培养小鼠圆形精子细胞在体外受精中的应用价值。方法：对玻璃化冷冻复苏的体外培养小鼠圆形精子细胞标记DAPI荧光染料，行小鼠卵泡浆内显微注射（ROSI）后观察其受精和胚胎发育过程。结果：解冻后精子细胞DAPI标记率为100%， ROSI后双原核期雄原核的DAPI标记率为80.0%，第一次卵裂的2细胞期标记率为77.3%；受精率、2-细胞率、4-8细胞率、桑囊胚率分别为51.9%、51.0%、41.8%和12.2%。结论：冻融小鼠圆形精子细胞具有一定的受精能力和胚胎发育潜能。
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