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研究背景 周围神经损伤后神经功能恢复欠佳是神经外科尚未解决的一大难题，神经损伤后神经元发生溃变、死亡，被认为是重要原因之一。组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator，tPA)是1996年美国食品和药物管理局批准用于治疗急性缺血性卒中的唯一溶栓药物，然而新近研究表明tPA参与谷氨酸过度刺激诱导的神经元兴奋性毒性死亡，还可加重局灶性脑缺血的神经元损伤。但有关tPA是否参与介导周围神经离断后相应脊髓神经元的退变，尚无直接实验证据。此外，纤溶酶原激活物抑制物1(type-1 plasminogen activator inhibitor,PAI-1)和神经丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin，NSP)分别是外周组织和中枢神经系统(central nervous system，CNS)中tPA的生理性抑制物，二者是否也参与调节tPA在该病理过程中的作用?为此，我们选择坐骨神经横断(sciatic nerve transection，SCNT)SD大鼠作为本研究的动物模型，对单侧神经轴突损伤后相应脊髓节段中tPA及其二种抑制物PAI-1、NSP的动态变化进行检测，同时结合脊髓前角运动神经元的形态学改变与存活率时程变化，初步研究tPA及其抑制物对坐骨神经离断后脊髓神经元退行性变的可能作用。 目的 探讨tPA及其抑制物在周围神经离断后相应脊髓神经元的退变过程中的可能作用。 材料与方法 雄性SD大鼠56只(体重180～200g)，随机分为6组，对照组6只(不做手术)，实验组50只。大鼠以戊巴比妥钠(30mg／kg)腹腔注射麻醉后，在右侧梨状肌下缘0.5cm处切断坐骨神经，远端切除1cm后埋于股二头肌中防止神经再接。于术后1天(day，d)、4d、7d、14d和21d(每个时间点10只大鼠)取脊髓L4～6节段，分别制作石蜡组织连续切片(n=4，片厚5μm)行HE染色、Nissl染色及tPA、PAI-1免疫组化染色，制作电镜超薄切片观察细胞超微结构变化(n=2)，同时提取伤侧脊髓总RNA对tPA、PAI-1、NSP mRNA的表达进行半定量RT-PCR(n=4)。