土壤中拮抗放线菌的筛选及其次生代谢产物的研究

• 作 者: 马海丹
• 机 构: 西北农林科技大学
• 出 处: 西北农林科技大学
• 发表日期: 2007年期
• 关键词: 放线菌 生物活性 链霉菌属 化学成分

本研究以高氏一号为分离培养基,从26份土样中分离到124株放线菌,通过皿内拮抗作用初步筛选,得到活性较佳的放线菌26株。经过进一步的生物活性测定,筛选出一株编号为S76的菌株,其发酵液和菌丝提取物都具有显著的杀菌活性。并对其次生代谢产物的化学成份进行了研究。主要研究结果如下:1通过皿内拮抗作用,筛选到26株具有较高抑菌活性的放线菌菌株,通过液体发酵,测定这26株放线菌发酵产物的杀菌活性,发现这26株放线菌都表现不同程度的杀菌活性。其中很多菌株发酵液对烟草赤星病菌、西瓜枯萎病菌、苹果轮纹病菌和马铃薯干腐病菌较为敏感,对烟草赤星病菌抑制率达70%以上的有22个,对西瓜枯萎病菌、苹果轮纹病菌和马铃薯干腐病菌抑制率高于70%的均有15个。2 S76菌株的生物活性研究结果表明,该菌株发酵液无论在离体还是在活体条件下均对多种农业常见病原菌有很强的抑制作用。S76菌株发酵原液对大部分供试病原真菌的菌丝生长抑制率在90%以上,其中对苹果轮纹病菌、马铃薯干腐病菌抑制作用达到了100%;对苹果炭疽病菌、苹果腐烂病菌、玉米大斑病菌的抑制孢子萌发作用分别为70.2%,74.4%和75.9%。抑制细菌及酵母菌生长的抑菌圈直径均在20mm以上,且抑菌圈清晰透明。活体实验表明,S76发酵液对小麦白粉病的保护和治疗作用为87.0%和76.9%。3应用经典分类鉴定方法对S76放线菌菌株进行了鉴定,初步判断其为链霉菌属的绿色类群。4采用硅胶柱层析和制备薄层层析等技术从S76的次生代谢产物中得到了6个纯化合物。通过理化分析和波谱数据(MS、1H NMR、13C NMR)分析,确定其中三个化合物的结构为邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(化合物Ⅰ), 2,5-二羟基苯乙酸(化合物Ⅳ),β-谷甾醇(化合物Ⅴ)。