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鸡马立克氏病(Marek’s disease,MD)是一种由马立克病毒(Marek’s Disease Virus,MDV)引起的、在各地广泛发生的传染性肿瘤病。虽有疫苗预防,但当MDV毒力变化或预防措施不到位时仍引起爆发。马立克氏病也是研究肿瘤疾病发病机理的理想模型。本研究通过MDV感染鸡,拟对前期研究筛选的与p53表达相关的差异表达新LncRNAs进行体内验证和体外功能获得性验证,并对其在血清中的含量进行检测分析,以探讨新发现的LncRNAs在MDV感染过程中的变化及其可能的功能,同时为MD血清临床检测标志物的筛选提供参考。应用MDV感染鸡,qPCR技术分析鸡脾脏p53相关的新LncRNAs转录水平。分析结果表明,与对照组相比,MDV感染鸡脾脏组织中PIG3LncRNA、TP53PB2LncRNA、TP53BP1LncRNA-1、TP53BP1LncRNA-2、TP53BP1LncRNA-3转录水平升高且差异极显著(P<0.01);TP53TG5LncRNA转录水平下降,差异显著(P<0.05)。对上述6个LncRNAs的体内验证分析结果表明,MDV感染后,鸡的脾脏组织中,p53相关LncRNAs的转录表达均发生显著的上调或下调,这种变化可能与MD肿瘤发生相关,进而促进了MD肿瘤的发生。通过构建TP53BP1LncRNA-3过表达载体转染DF-1细胞,应用抗性筛选标记观察进行阳性细胞筛选,应用荧光标记检测过表达载体转染细胞的效率,qPCR、Western Blot技术检测TP53BP1LncRNA-3在DF-1细胞中的过表达水平及其对p53表达的影响。研究结果表明,与空白对照组相比,TP53BP1LncRNA-3转录水平升高,且差异极显著(P<0.01);肿瘤相关因子p53转录水平和蛋白质表达水平均升高,p53转录水平升高差异极显著(P<0.01);其蛋白质表达水平升高差异显著(P<0.05)。MDV感染后与正常对照组鸡相比,其血清中的TP53BP1LncRNA-3转录水平升高,且差异显著(P<0.05);脾脏中的TP53BP1LncRNA-3转录水平升高,差异极显著(P<0.01),二者组间差异升高的趋势一致,但在组间差异水平上有所不同。对血清中TP53BP1LncRNA-3转录水平的分析,可以在一定程度上体现鸡脾脏中该指标的变化情况,说明该指标或可能作为临床检测MDV感染的标志物。本研究结果表明在感染MDV后,鸡脾脏组织中p53相关的6个LncRNAs均呈显著或极显著的上调或下调变化,在体外DF-1细胞的过表达TP53BP1LncRNA-3结果表明,TP53BP1LncRNA-3和p53在转录水平均组间差异极显著升高,p53蛋白质表达显著升高且有一定程度的上调作用。说明新发现的与肿瘤相关因子p53相关的6个LncRNAs转录水平均受到MDV的影响,其变化可能影响p53的表达水平,进而促进MD肿瘤的发生。MDV感染鸡血清和脾脏中的TP53BP1LncRNA-3表达水平分析结果表明,二者组间差异升高的趋势相同,血清中TP53BP1LncRNA-3表达水平变化,可为检测MD肿瘤血清检测标志物的筛选提供参考依据。