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目的:心肌肥厚是心脏对各种刺激产生的适应性增生,是一种产生缓慢而有效的代偿功能,但这种代偿功能可增加心肌的耗氧量,逐渐导致心力衰竭,使心血管意外风险增加,甚至发生猝死,探索预防、减轻甚至逆转心肌肥厚的方法意义重大。心肌肥厚的刺激因素包括机械牵张、压力负荷、缺血、缺氧、一氧化氮缺乏及各种炎症因子,其中内皮素-1（ET-1）是诱导心肌肥厚的原因之一。G蛋白结合胆汁酸受体1（TGR5）是一种由胆汁酸（BA）调控的细胞表面G蛋白偶联受体,又称为GPBAR1、M-Bar、CPR131或BG37,是GPCR家族中的一员,广泛表达于肝脏、小肠、心脏、骨骼肌、脾脏、肾脏、胎盘和白细胞等组织器官中,参与体内胆汁酸、糖代谢、脂代谢及能量代谢等病理生理过程。本课题以乳小鼠心肌细胞为研究对象,观察激动心肌细胞细胞膜上的TGR5受体对ET-1诱导的心肌细胞肥大的影响,并探索其可能的机制,为改善心肌肥厚提供治疗思路。方法:原代培养乳鼠心肌细胞。1、观察不同浓度ET-1培养不同时间对心肌细胞的影响。实验分组:空白对照组、ET-1 10-8 mmol/L组、ET-1 10-7 mmol/L组、ET-110-6 mmol/L组,各组分别干预12h、24h、36h、48h;分别检测各组心肌细胞表面积和总蛋白浓度,建立心肌肥大细胞模型。2、siRNA-TGR5转染心肌细胞。分为对照组、siRNA-NC、siRNA1-TGR5、siRNA2-TGR5和siRNA3-TGR5,转染6小时后采用Western blot和RT-PCR检测TGR5受体蛋白和TGR5mRNA表达水平,选择效果明显的siRNA-TGR5进行后续实验。3、观察TGR5激活对心肌细胞肥厚的影响并探讨其机制。实验分组:空白对照组:给予DMEM/F-12完全培养液培养48h;ET-1组:给予ET-1 10-6 mmol/L培养48h;ET-1+INT-777组:给予ET-1 10-6 mmol/L和TGR5受体特异性激动剂INT-777 30umol/L（根据本实验组得出的数据,论文暂未公布）共同培养48小时;ET-1+INT-777+TGR5siRNA1组:先予以TGR5 siRNA1转染心肌细胞6小时后,给予ET-1 10-6 mmol/L和INT-777 30umol/L共同培养48小时;ET-1+INT-777+TGR5 siRNA-NC组:先予以TGR5 siRNA空病毒转染心肌细胞6小时后,给予ET-1 10-6 mmol/L和INT-777 30umol/L共同培养48小时。采用图像分析系统测定心肌细胞表面积,BCA法测定细胞总蛋白量,RT-PCR检测TGR5、钙调神经磷酸酶（CaN）的mRNA,Western blot方法检测心房尿钠因子（ANF）、β-肌球蛋白重链（β-MHC）、TGR5、CaN、活化T细胞核因子3（NFAT3）的蛋白表达变化。结果:1、ET-1诱导心肌细胞肥大在10-8 mmol/L10-6 mmol/L浓度范围内成明显浓度依赖性,在48小时内培养的时间越长,心肌细胞肥大越明显。选择浓度为10-66 mmol/L ET-1培养48h建立心肌肥大的细胞模型。2、siRNA-TGR5转染心肌细胞的验证实验中,siRNA1-TGR5组TGR5mRNA明显减少,TGR5受体蛋白表达明显减少,siRNA-TGR5转染心肌细胞成功。选择siRNA1-TGR5进行后续实验。3、与对照组相比,ET-1组的心肌细胞表面积、总蛋白及促肥大因子表达增加,CaN及NFAT3的表达也增加。与ET-1组相比,ET-1+INT-777组的心肌细胞表面积、总蛋白及促肥大因子表达增加受到抑制,CaN及NFAT3的表达增加受抑制。与ET-1+INT-777组相比,ET-1+INT-777+TGR5 siRNA1组的心肌细胞表面积、总蛋白及促肥大因子表达增加,CaN及NFAT3的表达也增加;与ET-1组相比无统计学差异。与ET-1+INT-777+TGR5 siRNA1组相比,ET-1+INT-777+TGR5 siRNA-NC组心肌细胞表面积、总蛋白及促肥大因子表达增加受到抑制,CaN及NFAT3的表达增加受抑制;与ET-1+INT-777组相比无统计学差异。结论:在48h内,ET-1诱导心肌细胞肥大在10-8 mmol/L10-6 mmol/L浓度范围内成浓度依赖性和时间依赖性;激活心肌细胞膜上TGR5受体后可抑制ET-1诱导的小鼠心肌细胞肥大,其机制可能与抑制CaN-NFAT3信号通路有关。