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目的:利用液质联用技术对黄芩清肺汤进行化学成分分析,建立黄芩清肺汤指纹图谱,结合化学模式分析筛选差异标志物,并测定主要成分的含量,探究其对急性肺损伤大鼠的保护作用,为黄芩清肺汤临床应用奠定基础。方法:1.利用UPLC-MS法,结合对照品及文献查阅,采用Xalibur 4.0、Origin 2019b、Graph Pad Prism、ISotope Distribution Calculator等软件对黄芩清肺汤中化学成分进行定性分析。2.建立黄芩清肺汤的HPLC指纹图谱,使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》进行相似度评价;采用SPSS 21.0软件进行聚类分析,采用SIMCA 14.1软件进行偏最小二乘法-判别分析,并筛选黄芩清肺汤的差异性成分;将指认出黄芩清肺汤的共有峰成分进行定量分析。3.通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）及小分子药物靶点预测在线平台（Swiss Target Prediction）挖掘“黄芩”“栀子”中的化学成分及相关靶点;利用Uni Prot、David数据库对所得靶点进行名字注释,整理获得小分子靶标;利用Gene Cards、OMIM、Pharm Gkb数据库对疾病基因进行筛选;利用Bioinformatic数据库提取黄芩-栀子作用靶点和疾病基因交集;利用cytoscape软件构建化学成分-靶点网络;利用在线STRING软件获得活性成分和疾病共有靶点的蛋白质网络互作数据;利用Omic Share Tools对生物功能和通路信息进行富集,得到GO功能富集图和KEGG通路富集分析图。4.建立LPS空气滴注大鼠模型,造模成功的大鼠随机分为空白对照组（C）、模型组（M）、黄芩清肺汤低剂量组（HZL）、黄芩清肺汤中剂量组（HZM）、黄芩清肺汤高剂量组（HZH）、阳性药组（DEX）。其中HZL给予0.41g/kg,HZM给予0.81g/kg,HZH给予1.62g/kg,阳性药组给予腹腔注射2mg/kg地塞米松分别给予连续给药5天。实验结束后,应用血气分析评价各组大鼠动脉血氧分压情况,肺组织干湿称重得到肺组织干湿质量分数,肺组织HE染色观察各组大鼠肺组织结构损伤情况,Masson染色观察各组大鼠肺组织胶原纤维堆积情况,BCA试剂盒检测肺泡灌洗液蛋白浓度,和瑞化-吉姆染色观察肺泡灌洗液中中性粒细胞和巨噬细胞,自动细胞计数仪检测,MDA、CAT、SOD试剂盒检测各组大鼠肺组织MDA含量和CAT、SOD活力,MPO、IL-6、TNF-α、IL1β试剂盒检测各组大鼠肺泡灌洗液中MPO活性、VEGA的表达及IL-6、TNF-α、IL-1β含量,应用免疫组织化学分别检测各组大鼠肺组织中ColⅠ、α-SMA、Caspase-3、BAX、BCL-2、IKB-α、P-P65、P-P38蛋白表达。结果:1.通过UPLC-MS鉴定出黄芩清肺汤40个化学成分;其中26个成分归属于黄芩、14个成分归属于栀子。2.建立黄芩清肺汤指纹图谱,确定24个共有峰,相似度大于0.98。指认了8个共有峰,分别为京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷Ⅰ、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A,并对8种成分进行含量测定。3.通过网络药理学,黄芩清肺汤得51个活性成分,黄芩:栀子=2.4:1,200个活性靶点,急性肺损伤得1890个疾病靶点,取交集得123个共有靶点,2396条关联线,核心靶点为VEGFA、TP53、CASP3、AKT1、IL-1β、IL-6、TNF、HIF1A、PTGS2、MMP9、NFKBIA。GO富集3509条目,并且生物进程富集到脂多糖反应、活性氧代谢调节,生物功能富集到早期核受体活性与DNA转录因子结合,KEGG富集231条通路,涉及机体代谢更迭、信号传导、细胞生长与死亡及发展与再生相关,其中Apoptosis、TNF signaling pathway、MAPK signaling pathway与核心靶点重叠较多。4.血气分析结果提示急性肺损伤大鼠动脉血氧气分压值下降,动脉二氧化碳分压值升高,黄芩清肺汤干预后情况改善;HE结果显示急性肺损伤大鼠肺泡壁增厚,伴有弥漫淋巴细胞和中性粒细胞浸润,支气管管腔有嗜酸性粘液分泌,局部出血,血管周围可见嗜酸性浆液渗出。黄芩清肺汤干预后,少见肺泡壁增厚,断裂以及肺泡腔扩张,淋巴细胞和中性粒细胞浸润减少,改善间质内肺内结缔组织异常;Masson结果显示急性肺损伤大鼠肺部组织有胶原纤维堆积,黄芩清肺汤干预后,胶原纤维堆积情况减轻,胶原容积分数下降,面密度减少;干湿质量分数、肺泡灌洗液总蛋白浓度及中性粒细胞、巨噬细胞个数判断急性肺损伤的大鼠血管内高蛋白组织外渗,有肺水肿状况,与模型组比较,不同浓度黄芩清肺汤会降低干湿质量分数,肺泡灌洗液总蛋白浓度和总细胞个数,尤其是中性粒细胞和巨噬细胞;肺泡灌洗液中炎性因子表达及髓过氧化物酶活力检测结果显示急性肺损伤大鼠肺部被中性粒细胞浸润,并且伴随炎症反应持续,与模型组比较,黄芩清肺汤干预后,IL-6、IL-1β、TNF-α及MPO活力表达抑制;肺组织中氧化应激相关因子检测结果表明,与模型组比较,黄芩清肺汤抑制SOD和CAT表达,提升MDA含量,其中中剂量组和高剂量组干预效果为更好一些;免疫组织化学结果表明,黄芩清肺汤能够促进炎性因子IKB-α、细胞凋亡相关因子、BCL-2、胶原纤维相关蛋白ColⅠ、α-SMA的表达,抑制氧化应激相关蛋白P-P38,炎症相关蛋白P-P65,细胞凋亡BAX、Caspase-3的表达。结论:1.黄芩清肺汤中化学成分主要分为黄酮类、环烯醚萜类、萜类、有机酸类。2.黄芩清肺汤能够改善急性肺损伤后肺组织损伤。3.黄芩清肺汤通过抑制炎症反应、抗氧化应激和抗细胞凋亡改善急性肺损伤大鼠肺组织损伤情况。