知母中Officinalisinin Ⅰ对糖尿病小鼠降糖及神经保护机制研究

• 作 者: 刘健
• 机 构: 西南交通大学
• 出 处: 西南交通大学
• 发表日期: 2016年期
• 关键词: 糖尿病 知母 OfficinalisininⅠ基因 糖耐量 降糖机制

目的:　　探讨知母中OfficinalisininⅠ对于糖尿病小鼠的降糖作用和糖尿病神经损伤的保护作用，并迸一步研究其作用机制。　　方法:　　(1)利用四氧嘧啶制备的小鼠糖尿病模型，用OfficinalisininⅠ灌胃给药后，通过血糖检测，观察OfficinalisininⅠ对于小鼠糖耐量的影响和降糖效果;　　(2)采用体外α-糖苷酶抑制剂筛选模型，观察不同浓度OfficinalisininⅠ的糖苷酶抑制效果;　　(3)利用四氧嘧制备小鼠糖尿病模型，给予不同浓度OfficinalisininⅠ灌胃给药，检测gip-1指标;　　(4)利用四氧嘧啶制备的小鼠糖尿病模型，用OfficinalisininⅠ进行长期灌胃给药后，通过定期检测血糖变化，BNDF、GXH-PX指标，观察OfficinalisininⅠ对四氧嘧啶所引起的糖尿病降糖及神经保护功能;　　(5)利用MTT方法筛高浓度葡萄糖培养基对PC12神经细胞的最佳损伤浓度和损伤时间，及OfficinalisininⅠ的使用浓度，通过倒置相差显微镜和生化多功能酶标仪对PC12细胞的生长状况以及利用MTT对细胞活力进行检测，同时，对PC12细胞的葡萄糖消耗和LDH漏出以及SOD活性进行检测;　　(6)利用细胞MAPK信号阻断剂SB203580及PI3K阻断剂BEZ235考察OfficinalisininⅠ的作用机制。　　结果:　　(1)OfficinalisininⅠ可以提高糖尿病小鼠糖耐量。　　(2)OfficinalisininⅠ对α-葡萄糖苷酶没有抑制效果。　　(3)OfficinalisininⅠ可以有效促进GLP-1的生成，起到降血糖作用。　　(4)OfficinalisininⅠ长期给药可以有效降低糖尿病小鼠血糖含量，并且提高BNDF的生成和GXH-PX活力。　　(5)OfficinalisininⅠ可以显著提高由高糖损伤所导致的PC12细胞存活率，并降低LDH漏出率　　(6)OfficinalisininⅠ可以有效改善PC12细胞损伤下的葡萄糖消耗，并MAPK信号途径提高细胞存活率，PI3K阻断剂对OfficinalisininⅠ的细胞保护无显著影响，但葡萄糖消耗加强。　　结论:　　(1)OfficinalisininⅠ通过促进GLP-1可有效提高糖尿病小鼠糖耐量。　　(2)OfficinalisininⅠ长期给药可显著降低小鼠血糖，并促进BNDF的生成，提高GXH-PX活力对细胞神经具有保护作用。　　(3)OfficinalisininⅠ可改善因高糖所导致的PC12损伤及存活，并提高细胞抗氧化作用。　　(4)OfficinalisininⅠ通过MAPK信号途径对PC12细胞进行保护，并可能通过PI3K下有信号通路加强其对葡萄糖利用。